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研究目的:microRNA是一类约由22个核苷酸组成的非编码RNA,在AML的疾病发生及预后过程中发挥重要作用。既往研究显示miR-181a表达水平对核型正常AML患者预后有显著影响,尤其是伴有FLT3-ITD和/或NPM1野生型的高危患者,但miR-181a表达水平在不同FAB分型、不同核型及伴有不同基因突变的AML患者中与临床特征的关系尚未完全阐明,且miR-181a在细胞内具体的作用机制,尤其是与表观遗传学修饰的关系也有待研究。因此,本研究将分析在不同遗传学背景、不同FAB分型的初发AML患者中miR-181a表达量与各项临床指标及患者预后的关系;此外明确miR-181a在AML细胞株内的作用机制与细胞内蛋白乙酰化修饰的关系。研究方法:第一部分:收集初诊AML患者骨髓标本46例,Ficoll梯度离心分离单个核细胞,TRIZOL法提取总RNA,反转录后通过实时定量荧光PCR检测标本中miR-181a的表达量,统计学分析患者初诊时各项临床指标及长期随访结果与miR-181a表达水平的关系。第二部分:体外建立过表达miR-181a的AML细胞模型,蛋白质免疫共沉淀及蛋白质谱分析分离、鉴定乙酰化水平变化显著的蛋白种类,后在特定细胞株THP-1中研究miR-181a对细胞蛋白乙酰化修饰调控的具体机制。研究结果:在临床研究中miR-181a表达量具有明显FAB亚型依赖性,其中粒系AML表达量显著高于单核系;此外AML患者初诊时外周血白细胞计数、危险分层及是否伴有NPM1基因突变、是否存在MLL基因异常均显著影响miR-181a表达水平;在M1/2中miR-181a高表达患者对含Ara-C诱导化疗方案缓解率较高,且倾向于有更长的总生存期及无病生存期(OS P=0.0763,DFS P=0.0356),但在M4/5患者中并未观察到该现象(OS P=0.6183,DFS P=0.9331)。在体外细胞学实验中,miR-181a过表达显著增加白血病细胞内总蛋白乙酰化水平,蛋白质免疫共沉淀分离、纯化表观分子量介于85-120kD的乙酰化修饰显著增强的蛋白进行质谱分析,鉴定出靶分子PARP1蛋白;在伴有MLL-AF9融合基因的急性单核细胞白血病细胞株THP-1中miR-181a过表达使细胞阻滞于G2/M期并增加细胞凋亡水平,与应用PARP1抑制剂PJ34效果类似;在THP-1细胞中miR-181a不改变PARP1 mRNA表达水平,但下调其总蛋白水平,蛋白乙酰化修饰水平增强介导了这一过程。研究结论:在伴有不同遗传学背景的初发AML患者中,miR-181a表达量具有FAB亚型依赖性,且仅在急性粒系白血病M1/2患者中miR-181a表达水平越高,患者诱导化疗反应及预后越好。过表达miR-181a显著增强AML细胞蛋白的乙酰化水平,其中PARP1蛋白的乙酰化修饰是其下游重要的调控靶点,但在不同细胞株中miR-181a对PARP1蛋白总量的调控不同,在伴有MLL-AF9融合基因的THP-1细胞中miR-181a通过增强PARP1蛋白的乙酰化修饰水平对其总蛋白总量进行负调控,起到抗白血病作用。