大蒜素通过上调bax基因下调bcl-2基因诱导人结肠癌LS-174-T细胞凋亡

来源 :齐齐哈尔大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:cherrychenghui
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细胞凋亡(apoptosis)又称细胞程序性死亡,在肿瘤的形成和发展中起重要的作用,开展肿瘤细胞凋亡机制和凋亡相关基因表达调控的研究对肿瘤治疗具有重要的意义。目的:本研究以人结肠癌LS-174-T细胞为研究对象,探讨大蒜素调节bax/bcl-2基因表达诱导细胞凋亡的作用。方法:通过倒置显微镜,荧光显微镜,透射电镜观察LS-174-T细胞的形态结构;琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段化;流式细胞术检测细胞周期分布、细胞凋亡率和线粒体膜电位变化;荧光定量PCR检测bax mRNA和bcl-2mRNA表达水平,Western blot检测Bax蛋白和Bcl-2蛋白表达水平。结果:1.大蒜素作用人结肠癌LS-174-T细胞48h出现明显的凋亡特征,且有量效关系。2.大蒜素作用LS-174-T细胞48h诱导细胞凋亡的最佳浓度为18μg/mL;3.大蒜素作用LS-174-T细胞48h的IC50值为20.29μg/mL。4.流式细胞术检测结果显示,大蒜素将LS-174-T细胞阻滞于S期和G2期;随着药物浓度的增加早期凋亡所占百分比先增加后减少,晚期凋亡所占百分比不断增加;28μg/mL的大蒜素作用LS-174-T细胞48h后线粒体膜电位为110.36±0.96,与对照组相比显著降低(p<0.05)。5.在一定范围内bax mRNA的表达水平随大蒜素浓度增加而呈现增强趋势,bcl-2mRNA的表达水平随大蒜素浓度的增加而呈现减弱趋势。6. Western blot结果显示,在一定范围内随着大蒜素浓度增加Bax蛋白表达水平逐渐增加,Bcl-2蛋白的表达水平逐渐降低。结论:一定浓度大蒜素作用LS-174-T细胞一定时间,能上调bax基因表达,下调bcl-2基因表达,诱导细胞凋亡。
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