目前一般认为体温调节的重要中枢位于视前区下丘脑前部(preoptic anteriorhypothalamus，POAH)，该区含有温度敏感神经元，对来自外周和中枢温度信息起整合作用。辣椒素受体又称为香草酸受体(transient receptor potential vanilloid，TRPV1)，是非选择性阳离子通道，主要引起Ca2+流动，在离体实验条件下可被多种理化因素激活，主要有辣椒素，大于43℃的热和质子。在下丘脑，基底神经节等处发现有TRPV1mRNA存在，因此，我们推测下丘脑中的TRPVl可能参与发热时的体温调节。 环磷酸腺苷(cyclic adenosine monomphsopate，cAMP)是调节细胞功能和信息传递的重要介质，它也是发热反应的主要中枢介质。 TRPV1通道阻断剂capsazepine被广泛应用于对该通道的研究中，capsazepine可有效的抑制TRPV1的活化效应。 本研究通过应用外源性致热原脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)复制大鼠发热模型，结合使用TRPV1通道阻断剂capsazepine，观察各种实验条件下体温的变化、下丘脑神经细胞内[Ca2+]i，以及与中枢发热介质cAMP含量变化的关系，探讨TRPV1对脂多糖性发热过程的影响。 材料与方法： 一、实验动物及手术 选用健康雄性SD大鼠48只，体重250～280g，基础体温(38.1±0.2)℃，由中国医科大学实验动物中心提供。将动物随机分为4组，每组12只：正常对照组(N)、Capsazepine组(CPZ)、LPS组(LPS)和Capsazepine+LPS组(CPZ+LPS)。饲育室室温(20±2)℃，相对湿度40％-60％，昼夜光照节律12h：12h，单笼饲养，自由进食水。实验中各项操作按常规无菌操作规则进行。采用10％水合氯醛3ml·kg-1腹腔麻醉，参照大鼠脑图谱(A Stereotaxic Atlas of the Rat Brain)进行侧脑室插管。术后大鼠单笼饲养，常规喂养1 wk后进行实验。测量体温时将数字温度计探头插入大鼠直肠内6cm处，数值稳定后读数，以给药前1h测得的3次直肠温的平均值为大鼠基础体温。实验过程中0～1h内每隔15min，1～8h内每隔30min，测温一次，实验结束后检查插管位置，舍掉位置不正确的实验数据。 二、脑内cAMP含量的测定 每组大鼠于施加处理因素后300min时断头，迅速取出下丘脑组织50mg，加2ml冰醋酸进行匀浆，3500r·min-1离心15min，取上清于60℃烘箱中烘干，之后按照cAMP放免试剂盒(上海中医药大学同位素室提供)说明书进行测定。 三、下丘脑细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)测定 分离出下丘脑组织，制备成单细胞悬液，然后Fura-2/AM避光孵育负载，调激发波长340nm，发射波长510nm，采用日立F-3000型荧光双波长分光光度计测定。 四、数据分析 实验数据用均数±标准差(-x±s)表示；组间资料统计用单因素方差分析(ANOVA)检验。 实验结果： 1、在LPS诱导发热大鼠中，发热高峰期下丘脑中cAMP含量和[Ca2+]i显著升高。 2、预先侧脑室注射capsazepine能明显增强大鼠LPS性发热，同时下丘脑细胞中[Ca2+]i减少，cAMP含量显著增高。 讨论： 本实验中，大鼠腹腔注射LPS后，体温明显升高，240min达到高峰。发热持续480 min左右．观察到体温升高时，细胞内Ca2+浓度升高，cAMP含量随着体温的升高而增多，其含量变化与体温变化呈明显的正相关(r=0.956，P<0.01)，此结果与以往报道一致。 本实验观察到侧脑室预先注射TRPV1通道阻断剂capsazepine，再给予LPS，明显增强了LPS性发热反应，同时观察到下丘脑中cAMP含量也明显高于LPS组，提示TRPV1在LPS诱导机体发热效应中起重要作用；大鼠下丘脑神经细胞内Ca2+浓度的检测结果显示，正常体温条件下单独给予capsazepine，细胞内Ca2+浓度没有显著性改变。给予LPS后在体温达高峰时，细胞内Ca2+浓度显著升高。而预先注射TRPV1通道阻断剂capsazepine，再给予LPS，体温达高峰时，细胞内Ca2+浓度显著减少，提示capsazepine阻断TRPV1通道后不仅通过该离子通道内流的CA2+减少，可能还有Ca2+的外流或细胞器的再摄取。本研究结果提示，阻断TRPV1通道，能够增强大鼠LPS性发热的可能机制是：由于通过TRPV1通道内流的Ca2+减少，使TRPV1关联的抑热机构的激活受到影响，进而，使中枢发热介质cAMP产生增多，发热反应增强。但是，在体温升高以后，使TRPV1通道开放，引起Ca2+的进一步内流将引发细胞内何种生化反应，从而导致限制细胞内cAMP的产生，进而，限控体温的升高，这些需要进一步的深入研究。研究结果表明，下丘脑中的TRPV1参与了发热过程中的体温调节，特别是对限制体温升高的幅度具有重要的意义。 结论： 1、TRPV1的状态对正常体温水平没有影响。 2、TRPV1在发热过程中对限控体温的上限起重要的作用。