若尔盖湿地不同温度型纤维素分解菌的分离、鉴定和共发酵效果研究

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若尔盖湿地是我国原始生境保存较好的一片湿地。由于若尔盖高原湿地特殊的生态环境,为特殊的微生物种群的发育提供了条件。尽管我国对若尔盖湿地的动植物进行了较全面的研究,但迄今为止,对该地区的微生物资源的研究还未见报道。沼泽植被为湿地提供了丰富的有机质,湿地土壤中含有大量的纤维素类物质,粗纤维含量为37.78%,因此对若尔盖湿地纤维素分解菌进行研究,对于纤维素资源的利用和该地区微生物资源的开发有重要意义。本项研究结果如下: 第一.本试验从若尔盖湿地分布区采集三个沼泽土作为供试样品。若尔盖湿地含有大量微生物群落,真菌的数量为55~1467个/克,细菌:4.00×104~8.35×106个/克,放线菌:46.7~64.3个/克,真菌,细菌的数量较多,放线菌的数量较少,有大量的厌氧菌,纤维素分解菌分布规律为:细菌数>真菌数>放线菌数。分离到32株纤维素分解菌,包括真菌、细菌和放线菌。细菌种类相对较多,有短小杆菌属(Curtobacterium sp.)、芽孢杆菌属(Bacillus sp.)、短芽孢杆菌属(Brevibacillus sp.);真菌为青霉属(Penicillium)、放线菌为链霉菌属(Steptomyces)。 第二.样品中分离到的32株纤维素分解菌,根据其最适生长温度的范围来看,含有15℃~20C,25℃~30℃,40℃~50℃三个温度型的菌株,中温型的菌株最丰富,共14株,有细菌、放线菌和真菌。相对于其他地区,低温型的纤维素分解菌很丰富,全是细菌,有12株,细菌多有芽孢。高温型的菌株则较少,1株真菌,5株细菌。不同纤维素分解菌的降解能力相差较大,根据生长速率和CMC酶活筛选出14株分解纤维素能力较强的菌株,其中细菌11株,主要为芽孢杆菌属,真菌2株,放线菌1株,为链霉菌属。其中菌株B22显示了较强的纤维素分解能力,平均生长速率为1.47 cm/d,CMC酶活性达到480.5U,具有较大的应用潜力。 第三.运用正交试验得到固体曲发酵的最优配方设计,即麸皮与稻草粉之比对产酶影响最大,其次是(NH42SO4的浓度,料水比的影响最小。培养基最佳组合为:麸皮:秸秆粉=3∶7;(NH42SO4为2%;料水比=1∶1~1∶2。 第四.在纤维素分解发酵过程中,温度有由低到高的上升趋势,利用不同温度型的菌株混合发酵,可以充分发挥不同菌株间的协同效应。将三个不同温度型的菌株各选一株,按照排列组合的方式进行组合,并通过拮抗试验去除有拮抗作用的菌株组合。利用优选的固体曲配方进行混合发酵,发现4个最佳组合:B3—F2—B27,
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