目的建立乳腺癌拉帕替尼耐药细胞株，探讨Hippo通路中YAP蛋白在HER2阳性乳腺癌细胞拉帕替尼耐药中的作用及机制。
　　方法采用逐步增加剂量与高浓度反复间歇诱导乳腺癌细胞株Skbr3对拉帕替尼耐药，耐药株命名为Skbr3-LR。用拉帕替尼同时处理亲本细胞和耐药细胞株，cck-8法检测其耐药指数；结晶紫染色和平板克隆形成实验检测细胞的存活状况；定量PCR检测上皮-间质化改变。定量PCR及Western-blot检测YAP和TAZ表达的改变。以维替泊芬阻断耐药细胞株Skbr3-LR中YAP下游通路的激活，cck-8法检测其细胞活性的改变并计算IC50值的变化；结晶紫染色检测细胞存活数量的变化。定量PCR及Western-blot检测YAP表达的改变。
　　结果与亲本细胞相比，结晶紫染色和平板克隆形成实验结果均显示，耐药株存活细胞数量明显增多。亲本细胞耐药指数为3.61μmol/L，耐药株耐药指数上升约8倍，为29.26μmol/L。PCR结果显示，与亲本细胞比较，耐药细胞株的上皮标志物E-cadherin表达降低，而间质标志物Twist、Vinemtin和N-cadherin表达上升，YAP/TAZ表达上升，差异均有统计学意义(P＜0.05)。Western-blot结果显示，耐药细胞株中总YAP和磷酸化YAP表达均较亲本细胞显著上升(P＜0.05)。以维替泊芬阻断耐药细胞株YAP下游通路的激活后，其耐药指数为2.98μmol/L，较未处理的Skbr3-LR耐药指数下降约4倍；其存活细胞数量明显降低，YAP表达也明显降低(P＜0.05)。
　　结论成功建立了拉帕替尼获得性耐药的乳腺癌细胞模型，其耐药机制可能与Hippo信号通路下游的关键效应因子YAP表达的异常有关。