【摘 要】
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目的:论述人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs）移植对于多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）小鼠卵巢损伤的修复作用,并探讨该修复作用与AKT/NF-κB信号通路以及CD8+CD28-T细胞的关系。方法:利用脱氢表雄酮（dehydroepiandrosterone,DHE
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目的:论述人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs）移植对于多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）小鼠卵巢损伤的修复作用,并探讨该修复作用与AKT/NF-κB信号通路以及CD8+CD28-T细胞的关系。方法:利用脱氢表雄酮（dehydroepiandrosterone,DHEA）联合人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin,HCG）及高脂饮食建立胰岛素抵抗性PCOS小鼠模型,计算HOMA-IR水平筛选小鼠后,部分尾静脉注射hUC-MSCs悬液、腹腔注射吡咯烷二硫代甲酸铵（PDTC）溶液处理。称量小鼠体重;HE染色测定小鼠动情周期变化与卵巢形态变化;ELISA测定小鼠血清激素:雌二醇（E2）、促黄体生成素（LH）与睾酮（T）的具体改变;流式细胞术（FCM）测定小鼠脾脏组织CD8+CD28-T细胞比例;实时定量反转录聚合酶连锁反应（qRT-PCR）法测定卵巢AKT/NF-κB信号通路及凋亡相关基因包括caspases3、PAPR、Bcl-2 mRNA变化情况;蛋白印迹法（Western blot,WB）测定小鼠卵巢组织 AKT、p-AKT、NF-κB、p-NF-κB、caspases3、PARP、Bcl-2蛋白的表达改变。结果:与NC组比较,PCOS组小鼠胰岛素抵抗明显,HOMA-IR指数明显升高;体重增加;动情周期紊乱;HE染色观察卵巢组织存在大量闭锁卵泡;血清E2、LH、T水平升高,提示PCOS建模成功。PCOS组小鼠脾脏组织CD8+CD28-T细胞表达升高;卵巢组织中NF-κB、AKT、caspases3、PAPR mRNA表达下降,Bcl-2表达上升;NF-κB及AKT蛋白磷酸化水平升高,caspases3和PAPR蛋白表达增高,Bcl-2降低。经hUC-MSCs移植治疗或PDTC治疗后,PCOS小鼠卵巢功能显著改善,主要表现为:囊性卵泡数量减少,功能性卵泡数量增多;HOMA-IR指数恢复正常;血清E2、LH、T表达水平基本恢复正常;卵巢组织AKT/NF-κB信号通路及凋亡相关的mRNA及蛋白水平表达改善;流式细胞术结果显示,小鼠体内CD8+CD28-T细胞表达降低。结论:hUC-MSCs移植能够修复多囊卵巢综合征小鼠卵巢功能,该修复功能可能通过调整生殖内分泌激素水平、下调CD8+CD28-T细胞及抑制AKT/NF-κB信号通路下调小鼠体内细胞凋亡水平实现。
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