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建立一种运用基于PCR技术的基因芯片方法检测和鉴定志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌O157、霍乱弧菌、副溶血弧菌和单增李斯特菌的方法,为7食源性致病微生物的快速检测和鉴定提供了准确、快速、灵敏的方法。分别选取16S rDNA和重要致病基因,包括志贺氏菌侵袭性质粒抗原H基因(ipaH)、金黄色葡萄球菌凝固酶基因(coa)、沙门氏菌肠毒素基因(stn)、致泻性大肠杆菌O157志贺样毒素基因(slt)、霍乱弧菌溶血素基因(hly)、副溶血性弧菌编码TOXR蛋白基因(toxR)和单细胞增生李斯特菌编码clpE蛋白基因(clpE)设计引物和探针,进行PCR试验和基于不对称多重PCR技术的芯片试验,产物与含特异性探针的芯片杂交,并通过25株菌来评价该方法的性能。对7种实验细菌共25株进行检测,由芯片扫描仪输出的信号值表明,目标菌均得到阳性结果,其它非目标菌均为阴性结果,仅在以16S rDNA为靶基因的芯片试验中志贺氏菌、沙门氏菌和大肠杆菌O157存在假阳性。该方法对志贺氏菌、沙门氏菌和大肠杆菌O157的基因组DNA的检测限约为8 pg,对食品样品中的志贺氏菌、沙门氏菌和大肠杆菌O157的灵敏度为50 CFU/mL,同时进行了多重PCR电泳检测,基因组DNA的检测限约为16 pg检测,食品样品中的灵敏度为100 CFU/mL。本研究针对16S rDNA基因和与毒性密切相关的特异性基因建立的基于不对称PCR的芯片检测方法,对食源性致病微生物进行全面检测。该方法与现有的微生物检测方法相比,特异性更强、灵敏度更高,为食源性微生物的快速检测鉴定提供了新的发展方向,具有较强的实用意义和推广价值,适用于出入境检验检疫机构。