辛香喷鼻纳米乳剂制剂工艺及作用机制研究

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目的:运用多指标综合评价结合药效学指标,优选辛香喷鼻纳米乳剂组方最佳制剂工艺;研究其对变应性鼻炎(AR)小鼠的药效学作用;初步探索药物作用相关效应机制。方法:(1)以挥发油提取量为指标,通过L9(3)4正交试验确定挥发油最佳提取工艺;以包合率和回收率为指标,通过L9(3)4正交试验确定挥发油最佳包合工艺。采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对包合前后挥发油化学成分分析对比。以多指标综合评分为指标,通过L9(3)4正交试验设计确定最优中药水提醇沉工艺。(2)药效学研究将48只BALB/c小鼠随机分为6组:空白组、模型组、阳性药组、A组、B组、C组,每组8只。采用OVA致敏法建立小鼠AR模型。治疗1周,观测各组小鼠鼻部行为学症状积分,体质量、胸腺和脾脏质量及指数,鼻黏膜病理组织学改变,血清免疫球蛋白E(IgE)、卵白蛋白特异性IgE抗体(OVA-sIgE)以及胸腺因子白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-33(IL-33)水平。结果:(1)挥发油最佳提取工艺为:药材加水6倍量,浸泡1h,每次煎煮4h,提取2次;挥发油最佳包合工艺为:采用饱和水溶液法,挥发油与β-环糊精(β-CD)比值为1:6,包合温度为40℃,包和时间为3h。经GC-MS检测分析,包合前后挥发油主要成分无明显差异。水提醇沉最佳提取工艺为:加入10倍量水,煎煮3h,煎煮2次,加入95%乙醇使含醇量达到65%,静置醇沉过夜。(2)药效学实验表明,与模型组比较各治疗组小鼠症状明显改善(P<0.05),胸腺指数、脾脏指数均显著下降(P<0.01),各治疗组的小鼠鼻黏膜无明显腺体增生及嗜酸粒细胞浸润。与模型组比较,各治疗组血清中OVA-sIgE显著下降(P<0.05),总IgE也有所降低,胸腺细胞因子IL-4、IL-17、IL-33均有不同程度的降低。结论:优化后的辛香喷鼻纳米乳剂挥发油提取工艺得油量较高,挥发油包合工艺稳定可行;水提醇沉工艺已达到指标成分最高转移率,质量稳定的要求。辛香喷鼻纳米乳剂对AR小鼠疗效确切,其可能通过抑制胸腺细胞因子水平发挥抗AR效应。
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