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目的:探讨益母草碱(Leo)对大鼠心肌纤维化(MF)的影响及机制。方法:1、体内实验:采用大量异丙肾上腺素(Iso)皮下注射致大鼠MF模型,经Leo高、中、低(10.0、5.0、2.5mg·kg-1)3个剂量组和阳性对照药卡托普利(Cap)(4.0mg·kg-1)干预后,测定大鼠心重指数(HWI)、左心室重量指数(LVWI);HE染色、Masson染色法观察大鼠心肌纤维化程度;比色法检测大鼠血清中羟脯氨酸(Hyp)、超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;Western blotting(WB)法检测大鼠心肌组织中丝裂酶原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)磷酸化水平、转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)的蛋白表达。2、体外实验:采用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌成纤维细胞(MyoFbs)增殖模型,MTT法检测MyoFbs增殖活力;Elisa法检测MyoFbs Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)和Ⅲ型胶原(ColⅢ)的含量;WB法检测Leo对MyoFbs TGF-β1和CTGF蛋白表达的影响。3、体外实验机制研究:WB法检测活性氧(ROS)抑制剂 NAC、p38MAPK 抑制剂 SB203580 对 ColⅠ、ColⅢ、TGF-β1和CTGF蛋白表达的影响;流式细胞仪分析Leo对ROS的影响;WB法检测Leo对p38MAPK磷酸化水平的影响;结果:1、体内实验:与空白对照组相比较,Iso组大鼠HWI、LVWI明显升高;HE染色、Masson染色结果显示Iso诱导的大鼠心肌组织出现明显的纤维化改变,胶原含量显著增加;比色法结果显示大鼠血清中Hyp、MDA含量显著增加,SOD活性明显降低;WB结果显示,Iso模型组大鼠心肌组织中p38MAPK磷酸化水平明显升高、TGF-β1及CTGF的表达量显著增加。与Iso组相比,Leo各剂量组大鼠的HWI、LVWI出现明显降低;HE染色、Masson染色结果表明,Leo能够明显改善MF大鼠心肌的组织形态,减少胶原的沉积;大鼠血清中Hyp、MDA含量明显减少,SOD活性显著增加;同时,WB结果显示Leo可以降低p38MAPK的磷酸化水平,下调大鼠心肌组织中TGF-βi及CTGF的蛋白表达。2、体外实验.:与空白对照组比较,AngⅡ可显著提高MyoFbs的增殖率;AngⅡ组ColⅠ、Col Ⅲ、TGF-β1 CTGF表达水平升高;与AngⅡ组比较,Leo各剂量组MyoFbs增殖率均显著降低;Leo组Col Ⅰ、Col Ⅲ、TGF-β1和CTGF蛋白表达水平均明显降低;3、体外实验机制研究:与空白对照组比较,AngⅡ组Col Ⅰ、ColⅢ、TGF-β1和CTGF蛋白表达水平上升,ROS含量显著增加,p38MAPK磷酸化水平升高;与 AngⅡ 组比较,NAC、SB203580 组 ColⅠ、ColⅢ、TGF-βi和CTGF蛋白表达水平均明显降低,Leo可显著降低ROS含量,抑制p38MAPK磷酸化水平;结论:1、本实验中,Iso诱导的MF模型复制成功。2、Leo能够改善心肌组织形态,减少胶原沉积,降低TGF-β1和CTGF的蛋白表达,抑制Iso诱导的MF,其作用机制与氧化应激反应以及p38MAPK的表达相关。3、Leo能够抑制AngⅡ诱导的MyoFbs增殖活力,降低MyoFbs细胞中胶原含量,下调TGF-β1及CTGF的表达,从而抑制MyoFbs的增殖。4、Leo抑制AngⅡ诱导的MyoFbs增殖,从而达到抗MF的作用,其作用机制可能与降低ROS水平,抑制p38MAPK信号通路活化有关。