本文综述了双水相分配技术的研究进展和现状，并着重就金属螯合亲和分配系统的形成、特点和应用，金属螯合亲和配基的制备，以及亲和分配技术在过氧化物酶分离中的应用进行了分析。 考察并优化了双水相成相聚合物—聚乙二醇（PEG）上螯合Cu²⁺离子的反应条件：BF3的浓度、NaOH的用量、反应时间以及IDA的结合条件。发现环氧氯丙烷与PEG的摩尔配比与IDA—PEG的IDA取代度相关，得到了不同Cu²⁺含量的金属离子螯合配基(PEG-IDA-Cu（Ⅱ）-A(0.24 molCu²⁺／molPEG)、PEG-IDA-Cu（Ⅱ）-B(0.51molCu²⁺／molPEG)、PEG-IDA-Cu（Ⅱ）-C(0.75molCu²⁺／molPEG))。环氧活化PEG的反应条件为：室温，BF₃浓度0.50％，40％wt．NaOH用量2.5％，反应时间20h；IDA与环氧活化PEG的反应条件为：2mol／L的Na₂CO₃溶液，亚氨基二乙酸与环氧—PEG的摩尔配比为20，反应温度65℃，反应时间24h。 采用甲醛滴定和旋光—真空干燥法分别测定了PEG4000／（NH₄）₂SO₄和PEG4000／PES100双水相系统中的PEG被不同金属离子含量的亲和配基取代时的相图变化，研究结果表明：加入金属整合亲和配基对该体系相图的双结点曲线的影响较小，基本可以忽略。对PEG4000／（NH₄）₂SO₄系统，随着PEG被金属螯合亲和配基取代量的增加，结线的斜率先减小到一个较小值而后逐渐增大，但直至PEG全部被PEG-IDA-Cu（Ⅱ）取代，结点线的斜率仍然比没有加入PEG-IDA-Cu（Ⅱ）体系的结线斜率小。 考察了金属螯合亲和配基PEG-IDA-Cu（Ⅱ）对豆壳过氧化物酶亲和分配的影响。在PEG／无机盐系统（PEG4000／Na₂SO₄和PEG4000／（NH₄）₂SO₄），随着体系中PEG被PEG-IDA-Cu（Ⅱ）取代比率的增加，豆壳过氧化物酶略趋向于上相。在PEG／PES系统中，豆壳过氧化物酶有相对较高的分配系数。系统pH对分配的影响很小。PEG分子量的减小（从4000到2000），PES分子量的增大（从100000到200000），酶的分配系数均增大；随PEG浓度的增加，分配系数逐渐增大；当PEG浓度大于10（％w／w），分配系数基本恒定。体系中PEG被PEG-IDA-Cu（Ⅱ）取代比率的增加，酶分配系数有所增大，趋于在上相富集。综合考虑得率和纯化因子，选取最佳条件为：PEG2000 10％，PES200 14％，PEG-IDA-Cu（Ⅱ）取代PEG比率为10％系统，该系统中过氧化物酶的分配系数为27，纯化因子为2.8，回收率达到96％。