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本论文对动物源性食品中硝基呋喃类抗生素呋喃它酮和呋喃妥因及其代谢物的酶联免疫检测方法进行了系统研究。对于呋喃它酮,从其代谢物(AMOZ)出发,先将AMOZ与对醛基苯甲酸偶联,衍生为CPAMOZ,然后利用活化酯法将其与牛血清蛋白偶联制备免疫原,通过免疫新西兰大耳白兔得到高特异性和高灵敏度的多克隆抗体。利用戊二醛法将AMOZ与鸡卵白蛋白偶联制备包被原。通过优化包被抗原量、抗体稀释倍数、封闭液、离子强度和缓冲液pH,建立了异源间接竞争ELISA。该方法对NPAMOZ的IC50为0.47±0.08ng/mL,检出限(IC15)为0.04±0.008 ng/mL o利用活化酯法将CPAMOZ和辣根过氧化物酶偶联制备酶标抗原。通过优化抗体包被量、酶标抗原稀释倍数、封闭液、离子强度、缓冲液pH,建立了同源直接竞争ELISA。该方法对NPAMOZ的IC50为0.92±0.12 ng/mL,检出限(IC15)为0.1±0.08 ng/mLo抗体具有很好的特异性,除对呋喃它酮原药有交叉反应外,与其他硝基呋喃类药物及其代谢物的均没有交叉。选择鸡肉、鸡肝、牛肉、猪肉、虾、鲷鱼、木棉鱼、鱿鱼样品进行添加回收实验,样品被分别添加了浓度为0.2 ng/g、0.5 ng/g、1.0 ng/g、5.0 ng/g的AMOZ,经过过夜衍生后应用所建立的ELISA方法检测,回收率在74.3%-111.5%之间,且批内和批间的变异系数(n=3)小于20%。对添加回收结果进行方差分析,结果表明所建立的ELISA方法针对不同类别的动物组织的检测结果没有显著差异,方法具有很好的准确性和广泛的应用性。对于呋喃妥因从其代谢物(AHD)出发,先将AHD与对醛基苯甲酸偶联,衍生为CPAHD,利用混合酸酐法与牛血清偶联原制备免疫原,通过免疫新西兰大耳白兔得到高特异性和高灵敏度的多克隆抗体。利用活化酯法将CPAHD和辣根过氧化物酶偶联制备酶标抗原,通过优化抗体包被量、酶标抗原稀释倍数、封闭液、离子强度、缓冲液pH,建立了同源直接竞争ELISA。该方法对NPAHD的IC50为5.9±1.2 ng/mL,检出限(IC15) 0.51±0.12 ng/mL。抗体具有很好的特异性,除对呋喃妥因原药有交叉反应外,与其他硝基呋喃类药物及其代谢物的均没有交叉。选择鸡肉、牛肉、猪肉、虾、木棉鱼进行添加回收实验,样品被分别添加了浓度为2.0 ng/g、4.0 ng/g、20 ng/g、100 ng/g的AHD,经过过夜衍生后应用所建立的ELISA方法检测,回收率在71.7-104.1%之间,且批间和批内变异系数(n=3)小于20%。