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埃博拉出血热(Ebola hemorrhagic fever,EHF)和马尔堡出血热(Marburg hemorrhagic fever,MHF)分别是由埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)和马尔堡病毒(Marburg virus,MARV)引起的以急性,发热并伴有严重出血为症状的人兽共患烈性传染病。EBOV和MARV同属丝状病毒科,它们是目前人类所知最致命的病原之一,其致死率可高达90%,严重威胁着公众健康和国家生物安全,同时也是重要的生物武器及生物反恐防范对象。虽然EHF和MHF主要流行于非洲地区,我国尚未发现该病,但随着日益密切的国际贸易和人员流动,该病传入我国的风险日益增高。研究证明使用疫苗可有效预防和控制该病的传播和危害,因此开展EBOV和MARV的储备性疫苗研究对我国具有十分重要的公共卫生和生物安全意义。本研究在水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)反向遗传操作平台的基础上,通过限制性酶切位点改造,成功建立了嵌合型VSV反向遗传操作平台,将VSV基因组中自身囊膜糖蛋白G替换为ZEBOV,SEBOV或MARV的囊膜糖蛋白GP并成功拯救出重组病毒,分别命名为rVSV?G/ZEBOVGP,rVSV?G/SEBOVGP和rVSV?G/MARVGP。Western Blot和间接免疫荧光试验表明三种重组病毒的GP蛋白均能够正确表达且定位于细胞膜表面,免疫电镜结果表明GP嵌合在重组病毒粒子表面,重组病毒呈现典型的子弹状形态特征。进一步在小鼠上进行三种病毒的安全性评价,在观察期内小鼠未表现明显的体重下降和任何临床症状,初步表明三种重组病毒对小鼠具有良好的安全性。为了评估重组病毒对小鼠的免疫原性,将三种病毒以单独(1×106pfu)或三重联合(每种病毒1×106 pfu)经肌肉注射途径接种小鼠,初次免疫3周后用相同剂量加强免疫。利用ELISA和中和试验测定小鼠血清特异性抗体水平。结果显示,一次免疫后小鼠即能产生较高水平的GP特异性IgG和中和抗体,加强免疫后抗体水平显著上升。表明三种重组病毒在小鼠上具有良好的免疫原性。本研究在国内首次成功构建了以嵌合型VSV为载体的几种重要烈性外来出血热病毒储备性疫苗,并证明这几种疫苗无论单独或联合应用均对小鼠安全,且能诱导产生高水平中和抗体。本研究结果表明rVSV?G/ZEBOVGP,rVSV?G/SEBOVGP和rVSV?G/MARVGP作为防控EBOV和MARV的储备性疫苗具有潜在应用价值。重组病毒在非人灵长类动物(Nonhuman primates,NHPs)上的安全性和有效性需要进一步评估。