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目的研究常氧条件下姜黄素对人SK-Hep1肝癌细胞株HIF-1α及VEGF表达的影响,并进一步探讨姜黄素对Hep1细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法选取常氧条件下HIF-1α也能较高表达的人SK-Hepα肝癌细胞株,在37℃、饱和湿度、5%CO2、正常氧分压的环境下培养。当细胞处于对数生长期时进行实验。分别用姜黄素Oμmol/L,5μmol/L, 10μmol/L, 15μmol/L、20μmol/L对肝癌Hep1细胞进行干预。RT-PCR方法检测Hep1细胞HIF-1α及VEGF mRNA的表达。Western blotting方法检测]Hepl细胞HIF-1α及VEGF蛋白的表达。CCK-8法检测常氧条件下姜黄素对Hep1细胞增殖的影响,并绘制生长曲线,计算肿瘤细胞增殖抑制率。流式细胞仪检测常氧条件下姜黄素对Hep1细胞周期的影响,并计算细胞凋亡率。结果(1)在常氧条件下,Hep1细胞经10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L的姜黄素处理24小时后,HIF-1α和VEGF的mRNA及蛋白表达水平与空白对照组比较均明显上调,差异具有统计学意义(P<0.05),而实验对照组(姜黄素Oμmol/L,加入等量DMSO)及5μmol/L组与空白对照组比较差异没有统计学意义(P>0.05)。(2)与空白对照组相比,姜黄素处理各组的细胞增殖均受到不同程度的抑制,尤其以10、15、20μmol/L组更为显著,差异均具有统计学意义(P<0.01),而实验对照组(姜黄素0μmol/L,加入等量DMSO)的细胞增殖无明显差异(P>0.05)。(3)空白对照组、实验对照组、15μmol/L姜黄素组48小时细胞凋亡率分别为4.50±0.15%、4.72±0.70%、9.93±0.88%。与空白对照组相比,实验对照组Hep1细胞的凋亡率差异无统计学意义(P>0.05),而15μmol/L姜黄素组细胞的凋亡率明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)与空白对照组相比,姜黄素15μmol/L组G0+G1期细胞显著增多,G2+M期细胞显著减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论(1)常氧条件下,姜黄素上调肝癌Hep1细胞HIF-1α和VEGF mRNA表达水平和并呈浓度依赖性方式使蛋白的表达水平升高。(2)常氧条件下,姜黄素对肿瘤细胞HIF-1α表达的调节机制与缺氧条件下不同,姜黄素对肝癌Hep1细胞VEGF表达的上调可能与姜黄素上调HIF-1α的表达有关。(3)常氧条件下,姜黄素可有效抑制肝癌Hep1细胞的生长和增殖,具有明显的量效关系,其机制可能为干扰细胞周期进程,促进细胞凋亡。