指状青霉是造成柑橘果实采后损失最严重的病原菌。因此,研究其致病机理,有效防治指状青霉引起的病害是很有必要的。本实验通过对农杆菌介导指状青霉转化的体系进行优化,稳定高效地获得大量突变转化子,建立指状青霉突变体库。同时,对已获得的转化子进行比较分析,获得了一株不使柑橘果实发病的突变菌株,对该菌株进行了分子分析(PCR分析、Tail-PCR分析、Southern blot等),找出T-DNA插入位点,通过RNAi技术探究突变位点的基因与指状青霉致病性的关系。主要的实验结果如下:1.优化了农杆菌介导的柑橘指状青霉转化条件:硝酸纤维素膜(NC膜)为承载膜,农杆菌浓度OD600=0.6~0.8,指状青霉孢子浓度为2×106 CFU/ml,共培养时25℃恒温培养48h。此时的转化效率最高,能达到约20-50个转化子/皿。建立了含有一千多个转化子的指状青霉突变体库。2.通过接种已获得的转化子于柑橘果实上,进行对比分析,获得了一株不使柑橘发病的菌株,通过Southern blot、Tail-PCR实验,找到了两个T-DNA插入位点。3.针对两个突变基因,通过RNAi技术初步研究了其与指状青霉致病性的关系,但还需进一步研究。