约1/3的癫痫患者治疗困难称为难治性癫痫(RE)。最近有人认为细胞丢失现象、皮质发育障碍和多药耐药基因(MDRs)异常可能是RE的主要机制。这些MDRs基因的表达产物中P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)与RE关系较密切，但MRP1在RE中的确切作用还不完全清楚。因此，本课题利用MRP1转基因癫痫果蝇（bss、eas）研究MRP1在癫痫耐药中的作用。　　 方法：首先利用EagⅠ和KpnⅠ限制性内切酶双酶切pcDNA-MRP1质粒切下MRP1片断，插入pUAST质粒载体连接成pUAST- MPR1质粒。然后利用显微注射技术和果蝇杂交把构建成功的pUAST-MPR1质粒连同GAL4-elav基因一起，转入bss和eas有癫痫样发作的果蝇突变体，使这些果蝇能表达MRP1，建立MPR1癫痫果蝇模型。　　 给建立成功，且高表达MRP1的突变体bss；pUAST-MRP1；elav-GAL4（BME）果蝇喂食苯妥英钠(PHT)，并以bss;pUAST-MRP1;+、bss；+；elav-GAL4和bss；+；+等不能高表达MRP1的突变体果蝇为对照。然后进行撞击试验，观察果蝇癫痫样发作时间，分析BME对PHT的反应敏感性。同时也进行果蝇卵羽化率试验，观察PHT对果蝇羽化的影响。　　 结果：经过酶切、连接，最后找到了符合设计的质粒条带，经酶切、PCR及基因测序鉴定，确认pUAST-MRP1质粒构建成功。　　 经过微注射和杂交，pUAST-MRP1质粒基因和GAL4- elav一起转入了果蝇突变体bss和eas，建立BME和eas;pUAST-MRP1; elav-GAL4(EME)两种果蝇系，经PCR和Western Bloting鉴定，MRP1基因在这两种果蝇中均有表达。这两种果蝇均能诱发出癫痫样发作，说明MRP1转基因癫痫果蝇模型成功建立。　　 在急、慢性实验中发现，与对照组相比，BME品系果蝇对PHT的敏感性明显下降，而且雌性和雄性果蝇均存在这种关系。在雌性果蝇慢性PHT试验的平均恢复时间(MRTs)“未用药果蝇－用药果蝇”对比各组分别是：观察组（BME）为43.46-44.63，三个对照组为48.62-40.86、48.33-42.04和46.74-40.20。统计计算基因型与PHT疗效两个因素之间交互作用F=3.043，p=0.030，有统计学意义，表明基因型的改变（MRP1表达）对PHT的药效有影响。BME的其他三种试验结果与之类似。　　 果蝇卵羽化率实验发现，一定浓度的PHT使果蝇卵羽化率降低，但在BME品系（观察组）这种作用比对照组减弱，表明BME用药果蝇卵羽化率相对较高。　　 结论：构建成功的pUAST-MRP1质粒，配合不同的GAL4系统，可以根据需要驱动MRP1基因在一定时间和特定的部位表达，从而建立的MRP1转基因癫痫果蝇模型BME和EME，适合于研究MRP1对癫痫和抗癫痫药物影响。　　 MRP1的高表达增加了机体对PHT的耐药性。MRP1对PHT的毒性有一定的保护作用。