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目的:目前缺乏流感风热证动物模型的相关研究,本实验采用风热刺激+滴鼻感染流感病毒的方法构建流感风热证小鼠模型,并对模型进行评价。以期构建出符合临床病证特点的流感风热证动物模型,为相关方药和理论机制的研究提供载体。方法:1.风热刺激条件的探索:将36只KM小鼠按体重随机分为空白对照组、4h组、8h组,每天将4h、8h组放入37℃、50%RH、二档风速的气候箱内进行刺激,4h后将4h组取出,8h后将8h组取出,连续7天,第8天取材。观察小鼠的一般状态,监测体温、体重、进食量、饮水量,摘眼球取血做血常规检测,取肺组织计算肺指数。2.流感风热证小鼠模型的建立与评价:将72只KM小鼠随机分为空白对照组、风热组、病毒组、模型组、银翘散组（方证对应,简称YQS组）、散寒解热口服液组（非方证对应,简称SHJR组）。第1-7天,除空白对照组、病毒组外,均放入37℃、50%RH、二档风速的气候箱内,每天刺激8h。第8天,病毒组、模型组、YQS组、SHJR组在异氟烷轻度麻醉的情况下,滴鼻5LD50的流感病毒鼠肺适应株PR8,25μL/只,滴鼻后不再进行风热刺激,空白对照组和风热组以同样的方法滴鼻等量生理盐水。滴鼻2h后以方测证药物干预,YQS组、SHJR组分别灌胃银翘散药液、散寒解热口服液,连续灌胃3天,其他组灌胃等量的生理盐水。观察小鼠的一般状态,并对表征评分,监测体温、体重、饮水量、进食量。病毒感染后第3天取材,摘眼球取血做血常规检测,剥离鼻黏膜、肺组织,计算肺指数,制作病理切片。结果:1.风热刺激条件的探索:4h组和8h组小鼠兴奋度、活跃度增加,尾巴、脚掌颜色较空白对照组加深,小便量少,色黄,进食量均低于空白对照组,8h组最低,饮水量均高于空白对照组。8h组体重从第3—7天始终低于空白对照组,4h组体重第6—7天低于空白对照组。4h组体温第2天低于空白对照组,8h组体温第4、7天低于空白对照组。8h组肺指数、白细胞计数、中性粒细胞计数、单核细胞计数、淋巴细胞计数均显著低于空白对照组、4h组,4h组和空白对照组相比,无统计学差异。2.流感风热证小鼠模型的建立与评价:（1）一般状态:攻毒后第1天,模型组开始出现呼吸短促、发抖、头颈部耸毛,持续时间较短;攻毒后第3天,模型组出现呼吸短促、发抖、蜷缩、弓背,持续时间较长,自主活动减少,抓取无反抗,全身耸毛,尾巴、脚掌颜色偏红,个别有眯眼和眼部分泌物。病毒组、SHJR组表现与模型组相似,YQS组表现明显轻于模型组。（2）宏观表征积分:攻毒后第1、3天,模型组、病毒组积分均显著高于空白对照组,YQS组积分显著低于模型组、SHJR组,SHJR组与模型组相比,无统计学差异。（3）体重、攻毒前后体重差值:攻毒后第3天,模型组、病毒组体重显著低于空白对照组,YQS组体重显著高于模型组,SHJR组与模型组相比无统计学差异;模型组、病毒组攻毒前后体重差值显著低于空白对照组,YQS组显著高于模型组,SHJR组与模型组相比,无统计学差异。（4）饮水量、进食量:风热刺激后、攻毒后第1天各刺激组饮水量均高于空白对照组,攻毒后第2天,模型组饮水量低于空白对照组,但高于病毒组;病毒组、模型组进食量均低于空白对照组,YQS组进食量高于SHJR组、模型组。（5）体温:攻毒后第3天,模型组、病毒组体温显著低于空白对照组,YQS组显著高于模型组、SHJR组,SHJR组与模型组相比,无统计学差异。（6）血常规:病毒组、模型组白细胞计数、中性粒细胞计数、单核细胞计数显著高于空白对照组;YQS组白细胞计数、中性粒细胞计数显著低于模型组;SHJR组与模型组相比,无统计学差异。（7）肺指数、肺指数抑制率:病毒组、模型组肺指数显著高于空白对照组,YQS组肺指数显著低于模型组、SHJR组,SHJR组与模型组相比无统计学差异;YQS组肺指数抑制率大于SHJR组,SHJR组肺指数抑制率为负数。（8）鼻黏膜病理:空白对照组无明显病变;风热组黏膜上皮细胞排列紊乱,有少量纤毛脱落;病毒组鼻粘膜有大量炎性细胞浸润;模型组上皮细胞部分脱落,排列紊乱,有明显的炎性细胞浸润;YQS组上皮细胞排列整齐,纤毛无脱落,炎性细胞较少;SHJR组上皮细胞脱落较多,有大量的炎性细胞浸润。（9）肺组织病理:空白对照组和风热组无明显病变;病毒组和模型组肺泡壁增宽变厚,肺泡结构不完整,有大量的炎性细胞浸润,细支气管粘膜上皮细胞有脱落;YQS组肺泡结构清晰完整,未见明显炎性细胞浸润;SHJR组与模型组相似。结论:采用风热刺激（37℃、50%RH、二档风速、每天8h刺激、连续7天）+PR8流感病毒滴鼻所建立的小鼠模型,有明显的流感症状和病理表现,除未出现发热,其余表现符合风热证的证候特点,银翘散治疗对模型有明显改善,散寒解热口服液治疗无改善,反而加重鼻黏膜、肺组织损伤,以方测证结果证明模型所属证型为风热证,模型构建成功。