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目的:探讨SIRT3对肝癌细胞化疗药物敏感性影响的分子机制。方法:1通过Western blot和q PCR检测不同化疗药物作用下,SIRT3在肝癌细胞和永生化肝细胞中的表达水平。2通过MTS实验检测在化疗药物不同浓度作用下,过表达SIRT3对肝癌细胞SMMC-7721、Huh-7和PLC/PRF/5细胞活率的影响。3通过流式细胞术检测过表达SIRT3后,化疗药物处理组和对照组中肝癌细胞的凋亡比例;通过Western blot检测凋亡相关蛋白PARP和Caspase9的表达水平。4通过MTS和流式细胞术分别检测在化疗药物的作用下,沉默SIRT3对肝癌细胞SMMC-7721和Huh-7细胞活率和凋亡比例的影响。5通过Western blot检测不同浓度索拉菲尼对SIRT3在肝癌细胞中表达水平的影响,MTS和流式细胞术分别检测过表达SIRT3对肝癌细胞SMMC-7721、Huh-7和PLC/PRF/5细胞活率和凋亡比例的影响。6通过Western blot和q PCR分别检测在化疗药物处理组和对照组中,过表达SIRT3对肝癌细胞中GSTP1蛋白水平和m RNA水平的影响;以及磷酸化蛋白p-JNK、总蛋白JNK、磷酸化蛋白p-c-Jun、总蛋白c-Jun蛋白的影响;进一步通过IP实验检测过表达SIRT3对肝癌细胞SMMC-7721中GSTP1与SIRT3结合的影响。7通过流式细胞术和Western blot检测在不同化疗药物作用下,过表达GSTP1或对稳定表达SIRT3的肝癌细胞凋亡比例和凋亡相关蛋白PARP的影响。通过流式细胞术检测JNK抑制剂SP600125对HCC细胞凋亡的影响。结果:1在三种肝癌细胞SMMC-7721、Huh-7和PLC/PRF/5中,SIRT3的蛋白水平和m RNA水平明显低于永生化肝细胞MIHA;并随着化疗药物浓度的增加,SIRT3在肝癌细胞中的表达逐渐降低。2过表达SIRT3可以促进肝癌细胞SMMC-7721、Huh-7和PLC/PRF/5对三种化疗药物的敏感性。3在不同化疗药物作用下,过表达SIRT3可以增加肝癌细胞SMMC-7721、Huh-7和PLC/PRF/5的凋亡比例,并促进凋亡相关蛋白PARP和Caspase9的剪切。4 SIRT3基因沉默可以降低肝癌细胞SMMC-7721和Huh-7对化疗药物的敏感性。5在索拉菲尼的作用下,不同药物浓度可以降低肝癌细胞中SIRT3的蛋白表达水平,并且SIRT3过表达可以促进肝癌细胞SMMC-7721和Huh-7对索拉菲尼的敏感性。6在不同化疗药物作用下,过表达SIRT3可以下调肝癌细胞中GSTP1蛋白水平和m RNA水平,Western blot证明JNK和c-Jun蛋白磷酸化水平增高;进一步,IP实验证实GSTP1与JNK的结合减少。7在不同化疗药物作用下,过表达GSTP1或JNK抑制剂SP600125可以拮抗SIRT3过表达对化疗药物处理下肝癌细胞凋亡的促进作用。结论:SIRT3通过GSTP1/JNK信号通路促进肝癌细胞对化疗药物的敏感性。