【摘 要】
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目的:观察左卡尼汀（L-carnitine,LC）对高糖（High glucose,HG）诱导足细胞损伤的内质网应激和细胞凋亡的影响,为左卡尼汀的临床应用提供参考依据。方法:体外培养小鼠足细胞系细胞株MPC-5。将冻存于-80℃的MPC-5细胞解冻,放置于培养液中（RPMI-1640+10%FBS+100U/ml penicillin和l00mg/ml streptomycin、+含有40U/ml
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目的:观察左卡尼汀（L-carnitine,LC）对高糖（High glucose,HG）诱导足细胞损伤的内质网应激和细胞凋亡的影响,为左卡尼汀的临床应用提供参考依据。方法:体外培养小鼠足细胞系细胞株MPC-5。将冻存于-80℃的MPC-5细胞解冻,放置于培养液中（RPMI-1640+10%FBS+100U/ml penicillin和l00mg/ml streptomycin、+含有40U/ml IFN）,在37℃、5%CO2培养箱中进行增殖培养。后又移入培养液（RPMI-1640+10%FBS+100U/ml penicillin和l00mg/ml streptomycin）,不含干扰素,在37℃、5%CO2培养箱中进行分化、传代。细胞培养2周。每天对足细胞进行更换培养液。培养2周后,将已经分化好的MPC-5细胞株分为5组:（1）对照组（Control,CON）;（2）高渗组（mannitol,MN）组:给予甘露醇30m M;（3）左卡尼汀组（LC）组:给予左卡尼汀200μM;（4）高糖组（high glucose,HG）组:给予葡萄糖60m M;（5）高糖（HG）+左卡尼汀（LC）组:给予葡萄糖60m M+左卡尼汀200μM。处理48小时之后使用细胞增殖-毒性检测法（CCK-8）检测各组细胞活力;使用流式细胞法（Annexin V-FITC）检测细胞凋亡率;免疫印迹法（Western blot）检测免疫球蛋白重链结合蛋白（Bip）、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）,凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）的表达。结果:1.与CON组相比,HG组的细胞活力降低,HG+LC组与HG组相比细胞活力升高。具有统计学意义（P<0.01）2.与CON组相比,HG组的Bip蛋白表达明显升高,HG+LC组与HG组相比蛋白表达下降。具有统计学意义（P<0.01）3.与CON组相比,HG组的CHOP蛋白表达明显升高,HG+LC组与HG组相比蛋白表达下降。具有统计学意义（P<0.01）4.与CON组相比,HG组的细胞凋亡率升高,HG+LC组与HG组相比细胞凋亡率降低。具有统计学意义（P<0.01）5.与CON组相比,HG组的Bcl-2/Bax蛋白表达明显下降,HG+LC组与HG组相比升高。具有统计学意义（P<0.01）结论:左卡尼汀对高糖高渗诱导的MPC-5细胞损伤具有保护作用,其机制与左卡尼汀对下调内质网应激与抑制细胞凋亡有关。
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