论文部分内容阅读
甜樱桃(Prunusavium L.)属于蔷薇科(Rosaceae family)樱桃亚属(Subspecies Cerasus),果感硬脆饱满,口感独特,俗称“美容果”,是当前“消费增长最快的水果”之一。但樱桃三大病害之一的流胶病已然随着甜樱桃种植量的增多成为了阻碍樱桃行业持续健康发展的关键因素。目前国内外学者对甜樱桃流胶病的病原性生理生化研究并不深入,对其的防治研究更是少之又少。本文将研究引起甜樱桃流胶病的病原菌种类及病原的生物学特性,筛选出能有效抑制甜樱桃流胶病的药剂,使深入研究抑制机制和提升防治水平拥有一定的科学依据。本文从以下三个方面切入:首先运用组织分离法对有明显流胶现象的甜樱桃枝条进行病原菌的分离纯化,通过形态学分析、致病性检测和分子生物学鉴定来确定甜樱桃流胶病病原菌的生物学地位;通过营养缺乏、近紫外线照射及菌落划伤三种逆境方式诱导病原菌产孢;其次采用平板培养法以温度、氮源、碳源、pH、光照为因素,探究病原菌的生物学特性及致死温度区间;最后以病原菌为研究对象、以筛选出能有效控制甜樱桃流胶病的药剂为研究目的来进行5种药剂的室内毒力测定。实验结果如下:1.分离纯化流胶枝条得到三种优势菌株:菌株Ⅰ、菌株Ⅱ、菌株Ⅲ,依据Koch’s rule,判定致病菌株为菌株Ⅲ。对其进行形态学分析及ITS序列、EF-la序列分析判断,菌株 Ⅲ 为 Botryosphaeria dothidea。2.Botryosphaeria dothidea菌丝节状结构显著,内含横膈膜且呈树状分支,大多数菌丝可缠绕成网状结构;营养缺乏、近紫外线照射及菌落划伤三种逆境下均能诱发其产孢。孢子形态卵形或椭圆形,大小参差不齐,有聚集现象。3.温度、氮源、碳源、pH、光照均为Botryosphaeriadothidea生长的重要影响条件:最佳温度28℃;最佳N源为硝酸钠、硝酸钾类硝酸盐;最佳C源为葡萄糖;最佳酸碱度pH6.0;最佳光暗比12h:12h交替光照;水浴20min的致死温度域为50℃-55 ℃。4.供试药剂中,阿魏酸、硫酸锌和咖啡酸三种药剂对Botryosphaeria dothidea具有抑菌效果。EC50仅为7.16 mM的阿魏酸疗效最佳;硫酸锌和咖啡酸次之,EC50分别为25.57 mM和91.62 mM;硫氢化钠和丙酮酸乙酯对致病菌无抑制作用。