食管癌是世界十大恶性肿瘤之一，每年新增病例超过30万，五年生存率低于10％。而其长期生存率的提高和发病率的降低，在很大程度上依赖于对其病因与发病分子机理的的认识。以往的研究多注重在核酸水平上分离食管癌相关的基因(癌基因和抑癌基因)，虽然已取得一定的进展，但仍未发现食管癌特异表达的基因，更没有较好的早期诊断手段和治疗方法。本研究应用蛋白质组学方法(二维电泳和质谱)分析食管癌中表达异常的蛋白并用其它分子生物学方法加以验证，希望从中发现与食管癌发生、发展或转移相关的蛋白标志物。 为了减少组织的异质性对肿瘤和正常细胞蛋白表达谱的影响，通过观察HE染色定位组织标本中肿瘤和上皮细胞的分布，对食管癌／癌旁组织标本的冰冻切片进行显微切割，纯化肿瘤细胞和癌旁上皮细胞。采用高效表面活性剂、去污剂和变性剂(CHAPS，Thiourea，TBP，Spermine)，使细胞裂解更完全，蛋白的溶解性更好。特别是分子量较大和较小的蛋白，低丰度的蛋白，疏水蛋白和碱性蛋白。通过加入DNase和RNase，减少了二维电泳(2-DE)图像在水平和垂直两个方向上的拖尾(streaking)现象，较好地改善了2-DE图像的质量。 通过二维电泳分离得到了35对ESCC及癌旁上皮的2-DE图像。经ImageMaster软件分析，共发现25个在食管癌中异常表达的蛋白，其中9个蛋白在肿瘤中表达上调，16个蛋白表达下调。MALDI-TOF-MS鉴定及数据库检索结果显示，这些蛋白的理论分值和实际肽段覆盖率均具有较高的可靠性。其中，Annexin Ⅰ，HSP27，Tpr-met，DNA-PKCS等蛋白与细胞的信号传导、增殖、DAN复制／损伤修复及分化密切相关。 免疫组化结果显示，HSP27在食管癌旁正常上皮的中1/3部分表达较