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根据GenBank中鸡白介素6(ChIL-6)基因序列(AJ309540)设计一对引物，采用RT-PCR方法从ConA诱导的四川雅安土鸡脾淋巴细胞总RNA中扩增出约600bp的基因片段，克隆到pMD18-T载体，进行序列测定和分析。结果显示：该克隆的cDNA全长603bp，包含了鸡IL-6基因的开放阅读框585bp，编码195个氨基酸残基，与GenBank上仅有的1条鸡IL-6序列(AJ309540)的同源性为100％。生物信息学分析表明，该基因编码的蛋白具有亲水性，有很强的抗原性，有3个蛋白激酶C磷酸化位点，2个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点。该基因经Xho I和Xba I双酶切后，插入同样经Xho I和Xba I双酶切真核表达载体pCI-neo中，构建出真核表达质粒pCI-IL-6，通过免疫试验和攻毒试验观察其对新城疫LaSota疫苗的免疫增强作用。将21日龄非免疫健康雏鸡100只随机分为5组，肌肉免疫(LaSota疫苗组、pCI-IL-6+LaSota疫苗组、pCI-IL-6组、pCI-neo组和PBS组)。通过检测HI抗体、CD4~+、CD8~+和CD3~+T淋巴细胞百分含量，分析pCI-IL-6对LaSota疫苗的免疫佐剂效应。各组试验鸡在免疫接种后的不同时期，用血凝抑制试验(HI)测定NDV抗体，结果表明，pCI-IL-6和LaSota疫苗联合免疫组从第14天起就一直高于LaSota疫苗单独免疫组，在第14、21、35天时差异显著(P<0．05)，在28天时差异极显著(P<0．01)；pCI-IL-6和LaSota疫苗联合免疫组与其它试验组比较差异均极显著(P<0．01)。用流式细胞仪检测外周血代表T细胞亚群的CD4~+、CD8~+和CD3~+。CD4~+T淋巴细胞百分含量检测结果表明，pCI-IL-6+LaSota疫苗联合免疫组与LaSota疫苗单独免疫组相比，在14天出现差异显著(P<0．05)，在21、28天差异极显著(P<0．01)；pCI-IL-6+LaSota疫苗与其它试验组比较均差异极显著(P<0．01)。CD8~+T淋巴细胞百分含量检测结果表明，pCI-IL-6+LaSota疫苗联合免疫组和LaSota疫苗单独免疫组相比，在免疫后14天出现差异极显著(P<0．01)，第28天差异显著(P<0．05)；14天时与其它试验组比较均差异极显著(P<0．01)。CD3~+T淋巴细胞百分含量测定结果表明，LaSota疫苗联合佐剂pCI-IL-6组与单独LaSota疫苗组比较在7、28、35天差异显著(P<0．05)，在14、21天时差异极显著(P<0．01)；与其它试验组比较均差异极显著(P<0．01)。在免疫后35天进行攻毒，pCI-IL-6和LaSota疫苗联合免疫组的保护率为89．5％，而LaSota疫苗单独免疫组的保护率为76．5％。表明，pCI-IL-6能提高新城疫LaSota疫苗的免疫效果，能提高新城疫疫苗免疫的细胞和体液免疫水平及攻毒保护率。鸡IL-6真核质粒免疫佐剂效应的研究国内外尚未见报道。