食源性单核增生性李斯特氏菌毒力基因分布及致病力的研究

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单核细胞增生性李斯特氏菌(Listeria moncytogenes,以下简称为单增李斯特菌)是一种重要的食源性病原菌,主要会引起成人败血症和新生儿脑膜炎等疾病,死亡率可达30%。该菌广泛存在于动植物性食品中,并且对外界环境耐受性较强,可以在宽泛的温度范围(0~45℃)内生长。近年来随着冷藏和速冻食品的日益增多,食品中单增李斯特菌的潜在危险性也越来越大。自20世纪90年代以来,单增李斯特菌的研究已涵盖其生物学特征、检测技术、毒力基因以及流行病学等诸多方面。本论文以实验室保存的单增李斯特菌为研究对象,分析应答调控因子virR及其所调控的部分基因在单增李斯特菌中的分布及其规律性,并以此为依据对其进行分型,找出不同基因型与菌株来源之间的关系,以及对单个致病基因之间的毒力和不同基因型的单增李斯特菌的致病力进行比较。在分离自生鲜肉、水产品、果蔬、熟肉制品、速冻食品的171株单增李斯特菌中,virR、mprF、dltA、dltB、dltC、dltD的检出率分别为95.3%、98.8%、93.0%、95.9%、100%和89.5%,由此可见,这六个基因在单增李斯特菌中的检出率均较高,但还存在一定的差异。进行基因定型结果,鉴定为Ⅰ型的菌株最多,有138株,Ⅱ型的有24株,Ⅲ型的有1株,Ⅳ型的有8株。分析了不同基因型分布与菌株来源的关系,Ⅰ型占总体的80.7%,且该型在各类食品来源菌株中都较常见,尤其在熟肉制品中,检出率为100%。Ⅱ型菌株占14.0%,在除了熟肉制品的四类食品样品中均有一定分布,其中在果蔬中所占的比例明显高于平均值,在水产品和速冻食品中的比例低于平均值。Ⅲ型占总体的0.6%,且只存在生鲜肉中。Ⅳ型有8株,占总体的4.7%。对代表菌株的各毒力基因进行了小鼠致病力试验,结果发现virR,dltA和dltD三个基因对致病力均有不同程度的影响。virR基因的致病力无疑是最强的。其它基因总体上呈现出含毒力基因多的菌株致病力强的趋势。值得注意的是,随着毒力基因的减少,对致病力的影响程度也越来越小。各基因型的单增李斯特菌代表菌株对小鼠都有致病力,但程度上存在差异。在Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅳ型的代表菌株中,总体上体现的规律为:Ⅰ型最强,Ⅱ型次之,Ⅳ型最弱。鉴于目前状况,有待进一步对我国食品中单增李斯特菌的污染状况以及该病原菌的流行病学进行研究,为单增李斯特菌病的检测、防治以及追溯污染源提供依据。
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