【摘 要】
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生殖细胞是有性生殖的生物亲代与子代之间遗传信息稳定遗传的载体,哺乳动物的原始生殖细胞（primordial germ cells,PGCs）是在胚胎发育过程中最早出现的生殖细胞群体,是雌性和雄性生殖细胞共同的前体细胞。原始生殖细胞（PGCs）的正常发育是后续雌雄生殖细胞形成的基础。研究其发育分化机制可为因生殖细胞发育异常而导致的不孕不育疾病的治疗提供理论基础。由于原始生殖细胞在体内具有存在时间短,
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生殖细胞是有性生殖的生物亲代与子代之间遗传信息稳定遗传的载体,哺乳动物的原始生殖细胞（primordial germ cells,PGCs）是在胚胎发育过程中最早出现的生殖细胞群体,是雌性和雄性生殖细胞共同的前体细胞。原始生殖细胞（PGCs）的正常发育是后续雌雄生殖细胞形成的基础。研究其发育分化机制可为因生殖细胞发育异常而导致的不孕不育疾病的治疗提供理论基础。由于原始生殖细胞在体内具有存在时间短,数量少的特点,对原始生殖细胞的研究很大程度上依赖体外分化体系,本研究采用CRISPR-d Cas9系统和体外胚胎干细胞经拟胚体（embryoid bodies,EBs）向类原始生殖细胞（primordial germ cell-like cells,PGCLCs）诱导分化体系相结合,建立体外功能获得型基因筛选平台,分析目标细胞群体中所含感染筛选基因库中对应sg RNA富集程度,筛选出在胚胎干细胞向原始生殖细胞分化过程有正向调控作用的候选基因。我们检测了体内外原始生殖细胞中候选基因的表达水平,初步验证候选基因对原始生殖细胞发育可能存在的作用。在胚胎干细胞中对候选基因进行激活、过表达或敲低,检测其对类原始生殖细胞形成比例的影响,从而得到多个潜在促进原始生殖细胞分化的候选基因,根据候选基因功能进一步探究它们在原始生殖细胞形成过程的调控机制。综上所述,我们发现的新的原始生殖细胞调控基因有利于改进现有的体外诱导类原始生殖细胞分化体系,并为生殖细胞发育异常疾病提供新的临床思路。
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