目的本课题基于SREBP信号通路,从分子水平上探讨苦参碱通过影响肿瘤细胞脂代谢发挥抗肿瘤作用的机制,为临床研究提供实验依据。方法体内实验:利用CT26细胞建立荷瘤小鼠模型;灌胃不同剂量苦参碱,检测给药前后各组荷瘤小鼠肿瘤大小及重量,计算苦参碱的抑瘤率;肿瘤组织行HE染色,观察肿瘤组织形态学改变并对其进行核分裂象计数;油红O染色观察给药后肿瘤组织中脂质含量的变化,同时检测其游离脂肪酸(FFA)的水平;用qPCR法检测苦参碱干预前后肿瘤组织脂代谢相关酶的基因表达。体外实验:使用MTT法检测苦参碱对CT26增殖的影响;采用油红O染色及游离脂肪酸测试盒检测给药前后脂质含量的变化;通过qPCR和Western-blot检测肿瘤细胞中脂代谢相关基因SREBP1、ACLY、ACC、FASN的基因及蛋白的表达水平。探索苦参碱通过SREBP信号通路调节脂代谢发挥抗肿瘤作用的机制。结果1)动物实验结果显示,与模型组相比,苦参碱低、高剂量组均能显著降低荷瘤小鼠的肿瘤重量。油红O染色与FFA检测结果表明,苦参碱干预后荷瘤小鼠肿瘤组织中的脂质和FFA的含量明显减少。qPCR结果显示,与模型组相比,苦参碱低、高剂量组肿瘤组织中脂代谢相关基因SREBP1、ACLY、ACC、FASN表达水平显著下调。2)MTT结果显示苦参碱有效抑制CT26细胞增殖的最低浓度为0.4μmol/ml,该浓度被应用于后续实验。油红O染色与FFA检测结果表明,苦参碱能降低CT26细胞中的脂质含量。qPCR及Western-blot结果显示,苦参碱干预后,CT26细胞中脂代谢相关酶的基因SREBP1、ACLY、ACC、FASN m RNA表达水平显著下调,p SREBP-1、ACLY、ACC、FASN蛋白表达水平也显著下调。结论苦参碱通过调节SREBP信号通路,影响肿瘤细胞脂代谢进而发挥其抗肿瘤作用。