【摘 要】
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本文研究了2株乳杆菌的抗氧化能力,明确了植物乳杆菌Lactobacillus plantarum CGMCC 1.557和干酪乳杆菌Lactobacillus casei CGMCC 1.570的全发酵培养物及其组分的自由基清除
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本文研究了2株乳杆菌的抗氧化能力,明确了植物乳杆菌Lactobacillus plantarum CGMCC 1.557和干酪乳杆菌Lactobacillus casei CGMCC 1.570的全发酵培养物及其组分的自由基清除率和抗氧化酶活性。考察了植物乳杆菌对diquat诱导的鼠肠道氧化应激及炎症反应的影响,并进一步探究了其可能的作用机制。首先,就上述2株乳杆菌的抗氧化能力,本研究测定了2株乳杆菌全发酵培养物及其不同组分(发酵上清液、菌体悬浮液、胞内提取物)的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、O2·-和·OH的清除率以及总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。结果表明,2株乳杆菌的全发酵培养物对3种自由基的清除率均显著高于阳性对照维生素C(P<0.05),也均含有较高的抗氧化酶活性;2株乳杆菌的发酵上清液和菌体悬浮液的自由基清除率和抗氧化酶活性都显著高于各自的胞内提取物(P<0.05);并且2株菌抗氧化能力总体上无显著差异。接着,本文考察了植物乳杆菌对diquat诱导的小鼠肠道氧化应激及炎症反应的影响。选择了50只体重16~18 g的健康的C57BL/6雌鼠随机分为对照组、模型组、植物乳杆菌低剂量组、植物乳杆菌中剂量组和植物乳杆菌高剂量组这5组,每组10只,每5只为1笼。低、中、高剂量植物乳杆菌组小鼠每天分别灌胃1×107 CFU/m L、1×108CFU/m L和1×109 CFU/m L的植物乳杆菌,对照组和模型组灌胃生理盐水,灌胃容量为0.2 m L/10 g体重。灌胃21天,自由采食和饮水。实验第22天,对照组小鼠腹腔注射生理盐水,其余四组腹腔注射36mg/kg体重的diquat溶液,注射3 h后处死采样。测定血清和肠道的氧化应激指标;苏木精-伊红染色观察小鼠回结肠组织损伤程度;ELISA法测定小鼠回结肠炎症因子含量;q RT-PCR法测定回结肠炎症因子及相关蛋白的m RNA相对表达量。结果显示,不同剂量的植物乳杆菌对小鼠生长性能没有显著影响(P>0.05);模型组小鼠血清和结肠内丙二醛(MDA)和O2·-含量显著增加(P<0.05),且可以被较高剂量的植物乳杆菌有效降低(P<0.05),而小鼠回肠内MDA、O2·-和H2O2含量没有显著变化(P>0.05);小鼠回结肠在diquat诱导下发生了严重的炎症性组织损伤,并且不同剂量的植物乳杆菌可以不同程度地保护粘膜层,组织病理学评分差异有显著性(P<0.05);小鼠回结肠内IL-1β、IL-18和TNF-α的含量在diquat诱导下整体没有显著增加;在diquat诱导下,小鼠回结肠内NLRP3炎性小体激活通路的上游蛋白NF-κB在转录水平上被显著激活(P<0.05),但中下游通路蛋白NLRP3、ASC、Caspase-1等都没有被显著激活。综上研究,植物乳杆菌在体内外都具有良好的抗氧化能力,可以有效缓解diquat诱导的小鼠肠道氧化应激及炎症反应,以高剂量处理的效果更明显,但具体缓解机制有待进一步研究。
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