分子印迹膜在海水膝沟藻毒素检测中的应用

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膝沟藻毒素2&3(gonyautoxins 2&3,GTXs 2&3)是一种常见的氨基甲酸酯类的麻痹性贝类毒素(PSP),主要由亚历山大藻等甲藻产生。近几年,在我国近海区域,均有膝沟藻毒素的检出,尤其在辽东湾半岛区域,鱼虾、贝类中膝沟藻毒素的含量已超过食用标准。水体中的膝沟藻毒素,累积在鱼虾、贝类等生物体内,通过食物链传递、逐级放大,不仅影响水产养殖业的发展,更危害食品安全与人民健康。在前期研究中,为检测水体中痕量的膝沟藻毒素,通过热聚合制得分子印迹微球,用于分子印迹固相萃取,但由于海水在色谱分离中的流动扩散阻力,分子印迹微球制得的固相萃取柱对于大体积上样并不能得到良好的分离效果。本研究针对这个问题,制备分子印迹膜,分子印迹膜色谱与分子印迹微球填充柱相比,当床层体积一定时,膜色谱有利于获得更高的流速,提高分离速度,且消除了色谱中占主要地位的流动扩散阻力,大大改善了传质效果。具体内容如下:1、本研究以聚偏氟乙烯(PVDF)膜为基膜,热聚合的方法制备分子印迹复合膜,并对分子印迹膜复合膜进行性能和结构表征以及动力学和热力学研究。表征结果表明,该方法实现了分子印迹微球与基膜的化学结合,并且有良好的稳定性;对GTXs 2&3的吸附属于单分子层吸附,吸附量较高。2、以分子印迹膜为填料制得膜组件,用于分子印迹固相萃取;对分子印迹膜固相萃取方法进行优化,以及确定方法的检出限、准确性和柱子的再生性。结果表明,以分子印迹平板膜与微球混合填料作为固相萃取柱填料用于样品前处理,对GTXs 2&3有良好的分离效果。对标准样品的GTXs 2&3的方法检测限达到0.230μg·L-1,样品检出限为0.137μg·L-1,日间精密度与日内精密度良好。3、针对我国近海区域分泌GTXs 2&3有毒赤潮藻毒素的代表性藻种塔玛亚历山大藻进行研究,通过在实验室培养塔玛亚历山大藻,观察塔玛亚历山大藻在30 d生长周期内藻毒素的变化。结果表明,不同生长时期的塔玛亚历山大藻藻体都有GTXs 2&3检出,指数期浓度为4.362μg·L-1,稳定期为9.066μg·L-1
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