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第一部分复叶耳蕨黄酮对骨髓间充质干细胞增殖和定向成骨分化的影响目的：体外建立大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）的培养体系，探索复叶耳蕨总黄酮促进BMSCs成骨分化的的可行性。方法：取3-4周健康清洁级SD大鼠，采用全骨髓差速贴壁法体外培养BMSCs,倒置相差显微镜观察细胞形态和流式细胞仪检测P3代细胞表面标志物CD44、CD45、CD90和CD11b/c-,鉴定骨髓间充质干细胞。取P3代BMSCs,根据诱导条件不同分为不同组别,实验中记录细胞形态和功能改变,分别在第3、6和9天测定细胞内碱性磷酸酶活性（ALP）、矿化结节染色，RT-PCR检测Col1、OPN、OCN和OSX基因mRNA的动态变化。结果：原代细胞首次换液去除悬浮细胞后，呈现圆形贴壁细胞，4d-9d，长梭形或扁平形细胞增殖迅速，可见呈放射状的集落细胞，12d-14d，细胞紧密排列融合，呈典型的涡旋状或鱼群样生长。P3代BMSCs大致与原代细胞形态相似，CD45和CD11b/c-呈阳性，阳性率分别为91.96%和91.0%。而CD90和CD44呈阴性，阳性率为0.32%和1.37%，BMSCs均一性好，纯度达90%以上；诱导9天后，细胞增殖减弱，活性增加,细胞透明度明显降低,黑色团块增多,并呈铺路石样。随着成骨样诱导时间的延长,细胞内碱性磷酸酶活性呈明显的上升趋势,成骨细胞特异性分泌物Col1、OPN、OCN和OSX的基因转录和表达明显增加。结论：复叶耳蕨总黄酮可促进BMSCs向成骨样细胞分化，分化过程中Wnt/β-catenin信号通路和BMP信号通路活性增高。第二部分复叶耳蕨黄酮促进骨髓间充质干细胞定向成骨分化的机制目的：研究复叶耳蕨总黄酮对大鼠骨髓间充质细胞定向成骨分化的影响以及相关信号通路。方法：取P3代细胞，方法与第一部分相同,并检测BMSCs诱导分化过程中的WNT通路和BMP通路的相关因子mRNA转录和表达。结果：体外培养的细胞表达BMSCs细胞表面标志；复叶耳蕨总黄酮能提高BMSCs分化为成骨细胞，增强ALP活性、钙结节形成以及相关蛋白的表达、上调WNT通路和BMP通路以及骨桥蛋白、骨钙蛋白和I型胶原的mRNA的表达。结论：复叶耳蕨总黄酮能够上调BMP信号通路和WNT通路促进大鼠骨髓间充质干细胞定向分化为成骨细胞。