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黄曲霉毒素是具有极强毒性的霉菌次级产物,霉变饲料中黄曲霉毒素B1(AFB1)的含量以及活性最高。经口摄入含有AFB1的饲料能引起畜禽急性、亚急性或慢性中毒反应,诱发机体损伤甚至癌变。AFB1对畜禽健康以及畜牧行业产生极其严重的危害,因而阻断AFB1经消化道进入机体是阻止其对畜禽产生毒性的重要方法之一。姜黄素是从传统中药姜黄中提取的脂溶性酚类色素,具有抗炎、抗氧化、抗癌等效果,并对AFB1的毒性有较强的干预作用。P-糖蛋白(P-glycoprotein)是一种ATP依赖性膜转运体,在机体许多组织中都有分布。作为药物转运体,其可以将细胞内的底物向外排出进而降低细胞内的底物浓度,从而降低药效或者毒性。目前对于AFB1代谢研究主要集中在其靶器官肝脏,而肠道内同样含有丰富的药物转运体和Ⅰ相代谢酶,P-糖蛋白与Ⅰ相代谢酶是否共同参与AFB1在肠道吸收代谢过程却鲜有报道。本试验以AA肉鸡亚急性中毒模型为试验动物,探究肠道中P-糖蛋白与Ⅰ相代谢酶在AFB1吸收代谢过程中作用以及姜黄素的干预解毒作用。本试验以1日龄AA肉鸡为试验动物适应饲养3日后随机分成6组:1)空白对照组(饲喂不含AFB1和姜黄素的空白肉鸡饲料);2)姜黄素对照组(饲喂含有姜黄素450 mg/kg的饲料);3)姜黄素低剂量组(饲喂含有150 mg/kg姜黄素+5 mg/kg AFB1饲料);4)姜黄素中剂量组(饲喂含有300 mg/kg姜黄素+5 mg/kg AFB1饲料);5)姜黄素高剂量组(饲喂含有姜黄素450 mg/kg+5 mg/kg AFB1饲料);6)AFB1中毒模型组(饲喂含有5 mg/kg AFB1饲料)。连续饲喂28日后每组随机处死6只试验动物,迅速分离小肠,小心剥除胰腺、肠系膜以及脂肪后,通过眼观变化、病理组织学检查以及抗氧化指标(SOD、MDA)测定评价姜黄素对AFB1所致肠损伤的缓解作用;35 d时各组处死剩余6只试验动物,并做相同处理。通过检测药物转运蛋白P-糖蛋白基因MDR1表达以及相关ATP酶活性,探究P-糖蛋白与小肠内AFB1吸收的相关性以及姜黄素的影响。通过实时荧光定量PCR方法,对肉鸡十二指肠、空肠、回肠组织中细胞色素酶P450同工酶(CYP1A1、1A2、2A6、3A4)的基因表达进行检测,分析姜黄素对肉鸡肠道AFB1生物转化的影响。丰富肠道药物转运体与CYP450酶的研究资料,探究AFB1在肠道内的吸收与代谢。研究结果对AFB1中毒的防治以及姜黄素在兽医临床的进一步开发提供科学理论依据。结果如下:结合组织病理学与抗氧化试验结果表明,试验第28 d,日粮中添加5 mg/kg AFB1可引起肉鸡十二指肠绒毛破碎充血,导致其生长性能降低;十二指肠中MDA含量极显著增加(P<0.01),SOD活性极显著降低(P<0.01),抗氧化能力下降,引起肠损伤。通过添加不同剂量姜黄素,十二指肠损伤程度呈剂量依赖性减弱,其中高剂量姜黄素组MDA含量极显著降低(P<0.01),SOD活性极显著增加(P<0.01)。试验第35 d,AFB1模型组十二指肠绒毛充血同时MDA含量极显著增加(P<0.01),SOD活性显著降低(P<0.01)。不同剂量姜黄素添加组损伤程度减弱。P-糖蛋白基因表达与ATP酶活性结果表明,试验第28 d,AFB1模型组中小肠内P-糖蛋白mRNA表达以及相关ATP酶活性极显著降低(P<0.01),纵向对比发现十二指肠中P-糖蛋白mRNA表达以及相关ATP酶活性低于空肠和回肠。姜黄素添加剂对P-糖蛋白mRNA表达呈现剂量依赖性升高;纵向对比发现,姜黄素添加组十二指肠中P-糖蛋白mRNA表达以及相关ATP酶活性高于空肠和回肠。试验第35 d,各组之间P-糖蛋白mRNA表达以及相关ATP酶活性无明显差异。细胞色素酶P450基因表达检测结果表明,与空白对照相比,试验第28 d,小肠各段AFB1模型组中CYP1A1、CYP1A2、CYP2A6和CYP3A4的mRNA表达水平显著提高(P<0.05),纵向对比发现十二指肠中细胞色素同工酶的表达水平高于空肠和回肠。试验第35 d,各个分组之间四种Ⅰ相代谢酶mRNA表达水平无明显差异。本试验结果表明,日粮中添加5 mg/kg的AFB1抑制P-糖蛋白表达以及增强CYP1A1、CYP1A2、CYP2A6和CYP3A4的表达促进AFB1的生物活化是AFB1诱发肉鸡肠道损伤的原因之一;姜黄素通过提高小肠表达P-糖蛋白而减少AFB1在小肠内的吸收;抑制小肠CYP450同工酶(CYP1A1、CYP1A2、CYP2A6和CYP3A4)减少AFB1在小肠内活化是姜黄素干预AFB1肠道毒性的机制之一。