miR-181a表达载体的验证及其对胰腺癌细胞生物学行为的影响

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背景:胰腺癌是一种诊断治疗困难、预后差、死亡率高的恶性肿瘤,寻找新的肿瘤标记物和有效的治疗方法对胰腺癌具有十分重要的意义。microRNA (miRNA)是一类长约20-24bp的小分子RNA,它通过转录后调控基因表达参与多种生命进程。鉴于miRNA在多种肿瘤组织中的表达异常, miRNA可能作为新的肿瘤标记物和治疗靶点。针对胰腺癌miRNA表达谱研究发现miR-181a在肿瘤组织中的表达水平较正常组织和慢性胰腺炎组织有不同程度的提高,预示着miR-181a在胰腺癌发生发展中可能会起到一定作用。目的:通过建立胰腺癌细胞系1miR-181a过表达模型,探讨miR-181a对胰腺癌细胞系生物学行为的影响。方法:将插入miR-181a前体序列的重组表达载体和空白对照载体转染胰腺癌细胞系MIAPaCa-2,并运用实时定量PCR和报告基因系统检测载体瞬时表达有效性,进而检测不同组间生长、周期、凋亡、迁移和侵袭能力的差异。结果:实时定量PCR和双荧光素酶报告基因检测证明转染miR-181a重组载体可以使miR-181a表达水平提高,过表达miR-181a可以增强MIAPaCa-2细胞侵袭能力,对细胞生长、周期、凋亡和迁移能力则没有明显影响。结论:外源性导入miR-181a可成功建立]miR-181a过表达体外模型,miR-181a过表达的胰腺癌细胞侵袭能力增强。
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