目的:探索枯草芽孢杆菌上清对耐药金黄色葡萄球菌生物膜和药敏性的影响及分子机制,评估枯草芽孢杆菌上清在治疗骨髓炎中的作用,为预防和治疗骨感染提供思路。方法:收集枯草芽孢杆菌上清液（Bacillus subtilis cell-free supernatant,B.subtilis CFS）与金黄色葡萄球菌共培养,在体外实验中检测细菌生长曲线,生物膜形成量,以及对抗生素的敏感性。提取细菌RNA及细菌膜表面蛋白,检测细菌基因变化及蛋白合成情况。傅里叶变换红外光谱分析（FTIR）和透射电镜（TEM）观察细菌形态学的改变。建立小鼠内植物相关骨髓炎模型,设计两种实验方案在小鼠模型上评估金葡菌定植能力和对抗生素的敏感性。最后通过提纯蛋白,通过UPLC-MS/MS分析找到抗菌蛋白。结果:研究发现B.subtilis CFS不但能抑制耐药金葡菌的增殖和生物膜的形成,还可以增加其对青霉素和庆大霉素的敏感性。对其进一步研究表明,B.subtilis CFS抑制金黄色葡萄球菌粘附分子（cna和clfA）、毒力因子hla、群体感应（argA、argB和RNAⅢ）、青霉素耐药（mecA）和生物膜形成（ica和sarA）等基因的表达。TEM和FTIR等实验证明了 B.subtilis CFS改变了金黄色葡萄球菌的膜蛋白成分,增加了细菌外膜的通透性。最后,通过最小杀灭90%细菌持续时间（MDK90）证明了 B.subtilis CFS显著增加了金黄色葡萄球菌对青霉素的敏感性。在动物实验中,通过两种治疗模式证明了 B.subtilis CFS有效地减少了小鼠内植物相关骨髓炎模型中金黄色葡萄球细菌负荷。最后,B.subtilis CFS中有效成分分离纯化,经UPLC-MS/MS鉴定出抗菌物质为Lantibiotic subtilin。结论:B.subtilis CFS通过抑制金葡菌生物膜相关基因抑制了生物膜的生成,并改变细菌膜结构,使得其恢复对抗生素敏感性,减少细菌在小鼠体内的定植。试验数据支持来源于B.subtilis CFS中的抗菌蛋白Lantibiotic subtilin是一种潜在的治疗金黄色葡萄球菌骨髓炎的药物。