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铅在生活和工业生产中广泛使用,是一种常见的环境污染物。铅对环境造成污染的同时对人和禽类的健康带来了不利的影响。铅通过污染空气、水和土壤经食物链等途径进入人和动物体内,蓄积在脑组织中,对神经系统造成损伤,神经系统是铅中毒的靶器官之一。硒是人和动物机体必需的微量元素,具有抗氧化、拮抗和减弱重金属毒性的作用。本研究旨在讨论硒对铅引起的鸡神经毒性的缓解作用,为更好地理解硒对鸡神经铅毒性的缓解作用提供基础数据,为丰富铅的毒理学和硒的保护机制提供参考。本试验通过体内鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑和脑干组织与体外鸡胚神经细胞两部分来研究硒对铅引起鸡神经毒性的缓解作用。体内试验中,将180只1日龄的海蓝蛋公鸡任其自由采食和饮水饲喂到第7天后,随机分为对照组、硒组、铅组和硒铅组,每组45只鸡。对照组饲喂标准商品日粮(含硒量为0.4mg/kg)和饮用水;硒组饲喂添加硒的标准商品日粮(含硒量为1mg/kg)和饮用水;铅组饲喂标准商品日粮和含醋酸铅饮用水(含铅量为350mg/L);硒铅组饲喂添加硒的标准商品日粮(含硒量为1mg/kg)和含醋酸铅饮用水(含铅量为350mg/L)。分别于第30、60和90天每组随机抽取15只鸡进行安乐死,取出脑白质、脑灰质、小脑、丘脑和脑干组织进行各项试验检测。在体外试验,从6至9日龄的鸡胚中分离出鸡胚神经细胞,将鸡胚神经细胞分为对照组、硒组(硒浓度为10-7mol/L)、铅组(铅浓度为10-6mol/L)和硒铅组(硒浓度为10-7mol/L,铅浓度为10-6 mol/L),培养12、24、36和48h后进行各项试验检测。我们检测了以下内容:大脑(白质)、小脑、丘脑和鸡胚神经细胞中抗氧化指标(SOD、GPx、GST、CAT、T-AOC和NOS活性、MDA、NO、H2O2和GSH含量)、鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑、脑干组织和鸡胚神经细胞中硒蛋白(GPx1、GPx2、GPx3、GPx4、Txnrd1、Txnrd2、Txnrd3、Dio1、Dio2、Dio3、Sel T、Sel K、Sel S、Sel H、Sel M、Sel U、Sel I、Sel O、Selpb、Sepn1、Sepp1、Sepx1、Sepw1、Sep15和SPS2)、细胞因子(IL-2、IL-4、IL-6、IL-12、IL-17和IFN-γ)、热休克蛋白(HSP27、HSP40、HSP60、HSP70和HSP90)、细胞凋亡相关因子(Bcl-2、p53、Bax、Cyt c和Caspase-3)的mRNA表达、脑白质和胚神经细胞中细胞凋亡相关因子(Bcl-2、p53、Bax、Cyt c和Caspase-3)的蛋白表达、脑白质、脑灰质、小脑、丘脑和脑干的显微和超微结构和鸡胚神经细胞AO/EB染色,得出结论如下:(1)铅抑制了鸡脑组织和鸡胚神经细胞中SOD、GPx、GST、CAT、T-AOC和NOS的活性、诱导了MDA、H2O2和NO的含量、抑制了GSH的含量。大脑(白质)铅组中MDA含量随着时间的增加而增加,具有时间效应。硒缓解了铅引起的鸡脑组织和胚神经细胞中氧化应激指标的变化,铅中毒引起了氧化应激,硒缓解了铅中毒引起的氧化应激。(2)铅抑制了鸡脑组织和鸡胚神经细胞中硒蛋白GPx1、GPx2、GPx3、GPx4、Txnrd1、Txnrd2、Txnrd3、Dio1、Dio2、Dio3、Sel T、Sel K、Sel S、Sel H、Sel M、Sel U、Sel I、Sel O、Selpb、Sepn1、Sepp1、Sepx1、Sepw1、Sep15和SPS2的m RNA表达。脑白质铅组中GPx4的m RNA表达、丘脑和脑干铅组中Txnrd3的mRNA表达、丘脑铅组中Sel U和Sel O的mRNA表达、小脑铅组中SPS2的m RNA表达和鸡胚神经细胞中Sel U的m RNA表达随着时间的增加而下降,具有时间效应。硒缓解了铅引起的鸡脑组织和胚神经细胞中上述25个硒蛋白的降低。(3)铅抑制了鸡脑组织和鸡胚神经细胞中IL-2和IFN-γ的m RNA表达,引起免疫抑制;诱导了IL-4、IL-6、IL-12β和IL-17的mRNA表达,诱导炎症反应。脑灰质铅组中IFN-γ的m RNA表达随着时间的增加而降低,脑干铅组中IL-4和IL-12β的mRNA表达随着时间的增加而增加,具有时间效应。硒缓解了铅引起的炎症相关因子的变化,铅中毒引起了免疫抑制和炎症反应,硒缓解了鸡脑组织和鸡胚神经细胞中免疫抑制和炎症反应。(4)铅诱导了鸡脑组织和鸡胚神经细胞中HSP27、HSP40、HSP60、HSP70和HSP90的mRNA表达。脑灰质铅组中HSP40和HSP60的mRNA表达、脑干铅组中HSP70的m RNA表达随着时间的增加而增加,具有时间效应。硒缓解了铅诱导的鸡脑组织和鸡胚神经细胞中HSP的表达。(5)铅抑制了鸡脑组织和鸡胚神经细胞中Bcl-2的mRNA表达,脑白质和胚神经细胞中Bcl-2的蛋白表达,诱导了脑组织和胚神经细胞中p53、Bax、Cyt c和Caspase-3的m RNA表达,脑白质和胚神经细胞中p53、Bax、Cyt c和Caspase-3的蛋白表达。小脑铅组中Bax和Cyt c的m RNA表达、脑干铅组中Caspase-3的m RNA表达随着时间的增加而增加,具有时间效应。硒缓解了细胞凋亡相关因子Bcl-2、p53、Bax、Cyt c和Caspase-3的m RNA和蛋白表达,缓解了鸡脑组织和胚神经细胞的细胞凋亡。(6)铅引起了鸡脑组织炎性细胞浸润和细胞凋亡,诱导鸡胚神经细胞发生凋亡。硒缓解了铅引起的鸡脑组织炎性细胞浸润,缓解了鸡脑组织和胚神经细胞凋亡。铅诱导鸡神经组织发生氧化应激、引起炎症反应和脑组织损伤,诱导发生细胞凋亡,铅诱导了鸡的神经毒性,硒对铅引起的鸡神经毒性具有缓解作用。