水产养殖功能微生物的筛选与多菌种混合培养条件的研究

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为获得用于水产养殖的多菌种功能微生态制剂,本课题以实验室保存的耐盐荚膜红假单胞菌为基础,分离选育降解水产养殖残余饲料蛋白、淀粉以及净化氨氮作用的功能菌,研究功能菌的生长、降解特性,多菌种混合培养的条件优化以及多菌种功能微生物混合培养的生长关系,结果如下: 从家禽养殖场附近的土壤和饲料添加剂中,分离获得一株能高效降解水产养殖残余饲料蛋白、淀粉的功能菌株,经鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus. licheniformis)。该菌较适宜在pH6~8、盐浓度0~2%、温度37℃以及溶氧4mg/L 的条件下生长。同时,在饲料浓度≤5g/L, pH6~7,温度25~30℃,盐浓度0~1%,溶氧浓度近4mg/L 的水体生态条件下,接种1%地衣芽孢杆菌,饲料中的蛋白质与淀粉降解率可达近60%。从海水养殖水样中分离到了一株能高效降解养殖水体氨氮的功能菌株,经鉴定为假丝酵母属(Candida sp.)。该菌较适宜在pH4~7、盐浓度0~5%、温度25~30℃以及溶氧浓度近3mg/L 的条件下生长。同时,在养殖水体氨氮浓度≤20mg/L,pH6~7,温度25~30℃,盐浓度0~2%,溶氧浓度>2mg/L的水体生态条件下,接种5%假丝酵母菌,氨氮降解率达60%以上。通过研究3 种功能菌混合培养的接种顺序、培养基配方以及环境条件优化,最终确定3 种功能菌混合培养的工艺条件为:在葡萄糖10g/L,酵母膏10g/L,蛋白胨6g/L,氯化钠20g/L,硫酸镁0.2g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、磷酸氢二钾0.3g/L,pH6.5 的培养基中,先同时接种3%荚膜红假单胞菌和3%假丝酵母菌,置于35℃、200r/min 摇床培养至48h 后,再接种4%的地衣芽孢杆菌,并继续混合培养12h。此时,3 种功能菌均可分别达到较高的细胞生长量(107~109CFU/ml)。通过研究3种功能菌在各自混合培养与纯培养时的繁殖代数、生长速率常数以及世代时间,初步判定3种功能菌的微生态关系为:地衣芽孢杆菌在混合培养过程中,与其它两株功能菌株是无关共栖关系,而假丝酵母菌与荚膜红假单胞菌在混合培养过程中存在互惠互利的关系。本文筛选的地衣芽孢杆菌、假丝酵母菌及实验室保藏的荚膜红假单胞菌在生长与净化水质功能上存在优势互补的作用。本课题研究的多菌种混合培养条件以及多菌种混合培养之间的微生态关系,对复合型微生态水质净化剂的开发应用有着重要的实际指导意义。
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