目的:食管癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一,在未来10年发生率会不断增高。患者的预后较差,五年生存率仅为150%-250%左右。对于食管癌标志物的探索是近几年迅速发展的研究领域,对于食管癌的早期诊断以及预后评估有重要作用。近期大量研究表明,血小板计数、肿瘤长度以及营养状态等指标与食管癌患者的预后密切相关。食管癌患者的早期诊断对于改善患者预后意义重大。miRNA的表达水平高低可以作为肿瘤的诊断和预后指标,用于评价肿瘤发生、进展以及治疗效果。例如,血清miR-25、miR-223和miR-375可以作为食管鳞癌的诊断指标。血清miR-24和miR-200c同样可以作为评价患者化疗和同步放化疗疗效的无创性指标。miR-613在不同的肿瘤中发挥不同的作用,在乳头状甲状腺癌中低表达,在胃癌中却为高表达。可以靶向调节FNA基因以及Wnt通路。然而,miR-613在食管癌中的表达水平及其作用机制尚不明确。本文目的:探讨miR-613在食管癌肿瘤组织以及血清中的表达水平,并进一步探讨了其临床诊断和预后评价价值。资料和方法:我们纳入了齐鲁医院2014-10到2015-03之间胸外科75名拟接受手术治疗的食管癌患者的术前血清样本,同时收集了年龄及性别与之配对的正常人群的血清样本作为对照组。同时,我们收集了其中60位患者的食管癌组织及其周围正常组织(15例患者未行手术治疗,因拒绝手术或身体状态不适宜手术),术后30min内收集好肿瘤组织和癌旁组织,用液氮转移至-80度冰箱中保存。我们还收集了 2009年齐鲁医院病理科的109名食管鳞癌患者的福尔马林固定石蜡包埋的组织标本(FFPE)。所有患者均经手术或食管镜活检诊断为食管鳞癌。患者均未行术前抗肿瘤治疗。我们统计分析了患者的年龄、性别、吸烟及饮酒情况、肿瘤长度、位置、浸润深度(T分期)、淋巴结转移程度(N分期)、远处转移(M分期)以及分化程度总RNA提取及qRT-PCR检测RT反应体系总共25ul,qPCR体系为20ul,RNU6B和miR-16分别作为组织和血清中的内参。组织和血清中miR-613的相对表达量采用2-△ △Ct计算,FFPE中的表达量采用2-△ Ct计算。实验结果:1、食管鳞癌患者组织中miR-613的表达情况我们采用qRT-PCR方法分析肿瘤组织和癌旁正常组织中miR-613表达量。与正常组织相比,肿瘤组织miR-613的表达呈下调趋势(0.34±0.56vs.1.08±0.07,P<0.001)。同时分析miR-613的表达水平与患者临床特征之间的关系,我们发现miR-613的表达水平与患者T分期呈负相关(P=0.008)。2、血清miR-613的表达水平及其诊断价值我们首先假设组织miR-613的表达水平可能会影响血清中的表达情况。实验结果显示患者血清miR-613也为低表达趋势(0.89±0.73 vs.1.71 士 1.03,P<0.001)。血清miR-613的表达水平与患者N分期呈明显负相关(P=0.038),而与其他指标没有明显相关性。我们分析了患者食管癌组织miR-613与血清miR-613表达的相关性,Pearson相关系数为0.812(P<0.001)。我们分析了血清miR-613的诊断价值,曲线下面积(AUC)为0.767±0.040。Yuden指数,即cut-off值为0.875,R0C曲线的敏感性和特异性值分别为81.3%and 62.7%。对早期患者数据的进一步分析发现,AUC值为0.728±0.052(P<0.001)。3、miR-613在食管鳞癌患者预后的预测价值我们收集了 109名食管癌患者的FFPE标本,miR-613的平均表达水平为0.0016(cut-off值)。miR-613的表达水平与患者临床特征之间没有明显相关性。患者的平均生存时间为39个月(分布区间为6-81月)。截至末次随访,35名患者(32.11%)仍健在,而74名患者(67.89%)已去世。K-M曲线分析提示miR-613低表达组患者的五年总生存时间(0S)及无进展生存时间(PFS)明显较短(P= 0.018和P=0.035,respectively,)。进一步的多因素分析提示miR-613是患者 OS(HR(95%CI)0.591(0.336-0.954),P=0.031)和 PFS(HR(95%CI)0.656(0.485-0.888),P = 0.006,)良好的预后指标。结论:(1)与正常组织相比,肿瘤组织miR-613的表达呈下调趋势;(2)肿瘤组织中miR-613的表达水平与患者T分期呈负相关;(3)患者食管癌组织miR-613与血清miR-613表达的一定的正相关性,血清miR-613的表达水平与患者N分期呈明显负相关,并且具有一定的诊断价值;(4)miR-613低表达提示患者预后较差。