葛根素(Puerarin)是豆科植物野葛(Puerarin lobata)、甘葛藤(Puerarin thomsoni)或同属植物根中提取的一种有效成分,是葛根中提取的异黄酮类化合物中含量最多的成分之一。前人多从临床的角度对葛根素进行过药理分析,发现葛根素对于高血压、高血脂、冠心病、心绞痛、脑血栓等症状的治疗效果突出,对保护动脉血管内皮细胞、阻止动脉粥样硬化,防止血栓形成的作用也十分明显。但从细胞层次上对葛根素进行药理研究,特别是对葛根素所产生的毒副作用机制的研究至今还未见有相关文献发表。因此本实验从细胞电生理的角度对葛根素的药理作用进行了更深层次的研究,以期为葛根素的临床应用提供一定的更科学的理论依据。本实验研究方法是:1、实验前1小时配制好所需脑脊液并充以95% O2和5% CO2的混合气,取小部分冷冻保存;2、在乙醚麻醉下,快速断头并在冷冻液里取出包含海马的大脑部位,修整出所需海马区;3、将海马组织固定于振动切片机上切出300μm厚的海马脑片,用广口吸管转移至预孵育皿培养一小时,后再转移到记录用孵育槽内;4、拉制好玻璃微电极,并充以3mol/L的NaCl;5、调试好记录仪器,将脑片在孵育槽内培养2小时后进行实验;6、为了保证实验结果的准确性,每一块脑薄片只进行一个浓度的药品实验。本研究的主要内容有:1、葛根素药理研究的现状。其中主要涉及到葛根素资源概况,葛根素的基础研究和临床研究进展,葛根素的药理功能以及葛根素所引发的一些不良反应的病例综述。通过这部分的总结归纳,可知葛根素活性物质具有促进心脑血管和视网膜血液流动,舒张平滑肌解痉、抗促癌及诱导癌细胞分化、降血糖、降血压、抗氧化、解热解酒和提高记忆力以及增强免疫力等功能。2、大鼠边缘系统海马(hippocampal)区神经元自发放电类型及神经递质对其生理影响的研究。据我们的研究发现,海马的四个区(CA1、CA2、CA3和CA4)的放电规则有一定的差异,海马部神经元的放电类型主要有周期性排放型、阵发兼随机排放、周期排放与单个发放混发型、单波规则发放型、慢速发放、密集快放等六种类型。本实验旨在找到海马神经元自发放电的基本规律及不同部位的电生理差异,实验结果表明,其中CA1区的放电幅度和频率较理想,易于进行实验控制及分析,而其它三个区的放电规律有时波动很大,对分析实验结果可能会产生较大的干扰。在自发放电较稳定的脑薄片上单一、分次的灌流常规工具药谷氨酸(glutmate acid,Glu)、已酰胆碱(acetylcholine,Ach)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)、5-羟色胺(5-hydroxytryptae,5-HT)、甘氨酸(Glycine,Gly)等处理,发现Glu、Ach和5-HT对海马神经元有明显的兴奋作用,而GABA和Gly的抑制效应相当显著。作用的机制与海马区有相应受体的存在有关。3、葛根素对大鼠边缘系统海马组织CA1区神经元细胞的电生理影响。该实验是本研究的主体部分,在这项研究中,所采用的药物有葛根素、Ach和L-Glu等。首先,在电活性较好的脑薄片上进行单一的葛根素灌流实验,结果表明,葛根素对海马神经元的自发放电活动有很明显的抑制作用,其抑制方式主要是降低了了海马神经元生理电的发放频率,而对发放的幅度影响则很小。之后,通过在电活性较好的脑片上先进行兴奋性药物的诱发,待诱发性放电出现后1-2分钟再灌注一定浓度的葛根素进行实验观察,结果表明,一定浓度的葛根素(如1:1000)对海马神经元的诱发放电活动有显著的抑制作用。抑制的效应快,频率降低迅速而明显。葛根素药理作用的发生有浓度的最小阀值,而最大阀值(致死浓度)不明显。有很强的浓度依赖性。据实验研究推测,海马区神经元上有相应的受体存在,主要是β受体等。