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目的:1.评价激光诱导棕色挪威(brown norway,BN)大鼠脉络膜新生血管(choroidalneovascularization,CNV)模型的可行性,并从荧光素眼底血管造影(fundus fluoresceinangiography,FFA)、脉络膜铺片血管定量分析、病理、血管内皮细胞免染色疫组化法进行多方面比较。2.观察评价实验性脉络膜新生血管中血管内皮生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)与色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)的表达水平及相互关系。3.观察凉血化瘀方对激光诱导的BN大鼠CNV形成的抑制作用,从FFA检查、脉络膜铺片血管定量分析、病理、血管内皮细胞染色免疫组化法、VEGF与PEDF蛋白表达水平方面进行多方位评价。4.观察凉血化瘀方治疗湿性年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)患者的临床疗效,评价指标有:视力、FFA检查、眼底出血面积、渗出面积、累积损害面积、黄斑视网膜厚度、黄斑区总容积。方法:1.对4组24只BN大鼠单眼进行氪激光视网膜光凝,围绕视盘等距光凝20个激光斑,诱导CNV形成。激光功率360mW,光斑直径50μm,曝光时间0.05s。分别在光凝后1w、2w、3w、4w进行眼底彩照和FFA检查。在上述时间点各取2只大鼠进行脉络膜铺片定量分析血管面积;余4只处死,取眼球做石蜡切片,观察激光斑病理改变,FⅧR:Ag(FactorⅧ-Related Antigen,Ⅷ因子相关抗原)免疫组化法对新生血管进行半定量分析。2.通过石蜡切片观察CNV发展的4w时间内,不同时间点CNV中细胞因子VEGF和PEDF的蛋白表达。3.对3组48只BN大鼠行氪激光光凝,建立CNV动物模型,其中1组作为空白组,1组造模后玻璃体腔注射曲安奈德做为对照组,1组造模后予以凉血化瘀方灌胃作为中药组。分别在光凝后1w、2w、3w、4w行FFA检查。在上述各时间点处死各组动物4只,其中1只行异硫氰酸荧光素葡聚糖(Fluorescein isothiocyanate dextran,FITC-D)灌注、脉络膜铺片定量新生血管面积,余3只摘出眼球,制作石蜡切片,观察不同时间点CNV的中FⅧR:Ag、VEGF、PEDF表达的变化,并进行半定量检测。4.观察临床确诊为CNV型AMD的患者90例患者109眼,予以口服凉血化瘀中药治疗。连续观察6个月,总结视力,眼底出血面积、渗出面积、累积损害面积、OCT检查结果。分析比较治疗前后视力、眼底出血、渗出、累积损害面积、黄斑视网膜厚度和黄斑区总容积变化,并观察用药过程中不良反应。结果:1.在4w时间内,FFA检查、脉络膜铺片血管面积测量、病理切片、FⅧR:Ag因子免疫组化结果显示,实验性CNV在1w～3w期间呈持续性增殖(P＜0.05),到4w时稳定。2.在实验性CNV形成的过程中,VEGF蛋白表达明显增加、PEDF蛋白表达明显下降(P＜0.05)。3.凉血化瘀方治疗CNV组,FFA检查测量荧光渗漏面积可见3w～4w时,中药组CNV的荧光渗漏面积明显小于空白组和对照组(P＜0.05);脉络膜铺片新生血管面积测量可见4w时CNV面积明显小于空白组和对照组(P＜0.05);FⅧR:Ag因子和VEGF蛋白表达可见4w时中药组阳性反应物IOD值小于空白组和对照组(P＜0.05),而PEDF蛋白表达在1w～4w时则明显增加(P＜0.05)。4.凉血化瘀方治疗湿性AMD患者3月后,视力提高25眼(22.94%),稳定74眼(67.89%),降低10眼(9.17%);治疗6月后,视力提高32眼(29.36%),稳定60眼(55.05%),降低17眼(15.60%),低视力组患者视力提高和稳定程度均好于高视力组。治疗3、6个月后患者眼底出血面积、渗出面积、累积损害面积、黄斑视网膜厚度、黄斑区总容积改变无统计学意义。结论:1.激光诱导的BN大鼠CNV模型,与人类AMD的CqqV在发生、发展和病理基础上基本一致,是目前研究湿性年龄相关性黄斑变性的良好模型。2.FFA检查可确定CNV的生成,通过对CNV渗漏面积的统计,可半定量估算新生血管的生长情况。FITC-D血管灌注的脉络膜铺片法可保留CNV的原始形态,具有易观察性,并可做客观的定量统计,是研究CNV的可靠方法。FⅧR:Ag可标记血管内皮细胞,是判定CNV存在的有效方法。3.实验性CNV中VEGF的表达上调、PEDF表达下降,二者呈明显负相关关系。4.通过脉络膜血管铺片测量CNV面积、FFA检查、病理、免疫组化检查可观察到,凉血化瘀方可以显著抑制实验性脉络膜新生血管的生长,下调VEGF、上调PEDF蛋白表达水平。5.凉血化瘀方治疗湿性AMD患者在6个月观察期内具有一定的保持视力稳定和提高作用,能使眼底出血、渗出、累积损害和水肿瘢痕情况稳定;不良事件发生率低;是治疗湿性AMD患者的安全有效方法。