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目的:本实验旨在通过高通量测序技术测定莪术油作用于人卵巢癌裸鼠模型后肿瘤组织中mi RNA的表达水平,筛选出其中特异性表达的mi RNA指标,并对其进行分析。方法:选用5~6周龄,18~20g,雌性BALB/c裸鼠50只;按照随机原则将其中42只裸鼠右侧腋下皮下接种0.2m L 2×10~7个·m L-1人卵巢癌SKOV3细胞悬液;剩下8只裸鼠右侧腋下皮下注射0.2m L的RPMI-1640培养液作为本实验的空白组(30ml·kg-1(生理盐水));用游标卡尺测量注射了人卵巢癌SKOV3细胞悬液的裸鼠的肿瘤直径,待裸鼠的肿瘤直径长至平均2mm后按照随机原则分为模型组(30ml·kg-1(生理盐水))、莪术醇组(10mg·kg-1)、紫杉醇组(5mg·kg-1)、莪术油高剂量组(200mg·kg-1(莪术油注射液))、莪术油中剂量组(100mg·kg-1(莪术油注射液))、莪术油低剂量组(50mg·kg-1(莪术油注射液));共7组,每组7只(空白组8只),共50只;并开始分别给药(腹腔注射),隔天1次,共14次,连续28天;取材,并使用DNBSEQ、Agilent 2100、Bowtie2等进行结果测定、数据整理和数据分析。结果:(结果分析均参考NCBI数据库、中国知网;筛选条件:|log2FC|≥1&Qvalue≤0.001);⑴莪术油高剂量组和模型组相比较,差异表达的mi RNA有11条,其中与卵巢癌有关的mi RNA有6条:上调3条,分别为:hsa-mi R-199a-3p、hsa-mi R-205-3p、hsa-mi R-205-5p;下调3条,分别为:hsa-mi R-133a-3p、hsa-mi R-133b、hsa-mi R-423-5p;⑵莪术油高剂量组和莪术油中剂量组相比较,差异表达的mi RNA有1条,其中与卵巢癌有关的mi RNA有0条;⑶莪术油高剂量组和莪术油低剂量组相比较,差异表达的mi RNA有9条,其中与卵巢癌有关的mi RNA有3条:上调2条,分别为:hsa-mi R-206、hsa-mi R-512-3p;下调1条,为:hsa-mi R-423-5p;⑷莪术油高剂量组和莪术醇组相比较,差异表达的mi RNA有10条,其中与卵巢癌有关的mi RNA有4条:上调3条,分别为:hsa-mi R-199a-3p、hsa-mi R-205-3p、hsa-mi R-205-5p;下调1条,为:hsa-mi R-423-5p;⑸莪术油高剂量组和紫杉醇组相比较,差异表达的mi RNA有4条,其中与卵巢癌有关的mi RNA有3条:上调2条,分别为:hsa-mi R-205-3p、hsa-mi R-205-5p;下调1条,为:hsa-mi R-423-5p;⑹莪术油中剂量组和模型组相比较,差异表达的mi RNA有6条,其中与卵巢癌有关的mi RNA有4条:上调0条;下调4条,分别为:hsa-mi R-133a-3p、hsa-mi R-133b、hsa-mi R-206、hsa-mi R-423-5p;⑺莪术油中剂量组和莪术油低剂量组相比较,差异表达的mi RNA有6条,其中与卵巢癌有关的mi RNA有1条:上调0条;下调1条,为:hsa-mi R-423-5p;⑻莪术油中剂量组和莪术醇组相比较,差异表达的mi RNA有3条,其中与卵巢癌有关的mi RNA有2条:上调0条;下调2条,分别为:hsa-mi R-133a-3p、hsa-mi R-133b;⑼莪术油中剂量组和紫杉醇组相比较,差异表达的mi RNA有3条,其中与卵巢癌有关的mi RNA有1条:上调0条;下调1条,为:hsa-mi R-423-5p;⑽莪术油低剂量组和模型组相比较,差异表达的mi RNA有24条,其中与卵巢癌有关的mi RNA有6条:上调2条,分别为:hsa-mi R-1246、hsa-mi R-199a-3p;下调4条,分别为:hsa-mi R-133a-3p、hsa-mi R-133b、hsa-mi R-206、hsa-mi R-512-3p;⑾莪术油低剂量组和莪术醇组相比较,差异表达的mi RNA有14条,其中与卵巢癌有关的mi RNA有4条:上调0条;下调4条,分别为:hsa-mi R-133a-3p、hsa-mi R-133b、hsa-mi R-206、hsa-mi R-512-3p;⑿莪术油低剂量组和紫杉醇组相比较,差异表达的mi RNA有12条,其中与卵巢癌有关的mi RNA有1条:上调0条;下调1条,为:hsa-mi R-512-3p;⒀莪术醇组和模型组相比较,差异表达的mi RNA有5条,其中与卵巢癌有关的mi RNA有0条;⒁莪术醇组和紫杉醇组相比较,差异表达的mi RNA有8条,其中与卵巢癌有关的mi RNA有4条:上调3条,分别为:hsa-mi R-133a-3p、hsa-mi R-133b、hsa-mi R-206;下调1条,为:hsa-mi R-199a-3p;⒂紫杉醇组和模型组相比较,差异表达的mi RNA有13条,其中与卵巢癌有关的mi RNA有4条:上调1条,为:hsa-mi R-199a-3p;下调3条,分别为:hsa-mi R-133a-3p、hsa-mi R-133b、hsa-mi R-206;⒃空白组未形成肿瘤组织,故不参与比较;⒄莪术油高剂量组、莪术油中剂量组、莪术油低剂量组共同表达的mi RNA有3条,其中与卵巢癌有关的mi RNA有2条,均下调,分别为:hsa-mi R-133a-3p、hsa-mi R-133b;莪术油高剂量组、莪术油中剂量组、莪术油低剂量组之间两两比较均未出现明显差异表达,三组分别与模型组相比较均出现明显差异表达(筛选条件:|log2FC|≥1&Qvalue≤0.001);其GO功能富集分析和KEGG通路富集分析结果如下:GO功能富集分析(筛选条件:P value≤0.05)共得到574个条目:其中,Biological process有351个条目;Cellular component有94个条目;Molecular function有129个条目;KEGG通路富集分析(筛选条件:P value≤0.05)共得到24个条目,通过查看其通路注释和疾病注释信息,发现hsa-mi R-133a-3p、hsa-mi R-133b主要是通过靶向PIK3CD来调控磷酸肌醇代谢的途径发挥对于卵巢癌的作用。结论:1)莪术油高剂量组、莪术油中剂量组、莪术油低剂量组共同表达的mi RNA有2条,均下调,分别为:hsa-mi R-133a-3p;hsa-mi R-133b;2)就hsa-mi R-133a-3p;hsa-mi R-133b在每个样本中的表达量而言,本次实验并未发现莪术油对卵巢癌的治疗存在量效关系;3)KEGG通路富集分析结果显示:hsa-mi R-133a-3p、hsa-mi R-133b主要是通过靶向PIK3CD来调控磷酸肌醇代谢的途径发挥对于卵巢癌的作用。