【摘 要】
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目的:探讨姜黄素对氧化损伤环境下的雪旺细胞的保护作用及其可能的机制,为其临床治疗周围神经损伤提供理论依据。方法:体外培养RSC96细胞,随机分为3组:正常组(Control,Con),模型组(H2O2),姜黄素组(0.45m M H2O2+25μM Curcumin,H2O2+CUR)。随后进行以下实验:1.确定H2O2造模浓度和干预时间0~0.75 m M H2O2处理RSC96细胞不同时间,W
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目的:探讨姜黄素对氧化损伤环境下的雪旺细胞的保护作用及其可能的机制,为其临床治疗周围神经损伤提供理论依据。方法:体外培养RSC96细胞,随机分为3组:正常组(Control,Con),模型组(H2O2),姜黄素组(0.45m M H2O2+25μM Curcumin,H2O2+CUR)。随后进行以下实验:1.确定H2O2造模浓度和干预时间0~0.75 m M H2O2处理RSC96细胞不同时间,WB检测焦亡相关蛋白Caspase1、Cleved-caspase1和GSDMD、GSDMD-N表达。2.确定姜黄素干预浓度使用不同浓度的姜黄素(25-100μM)预处理RSC96细胞15 min,加入0.45 m M浓度的H2O2共同作用RSC96细胞24 h,CCK-8检测细胞存活率。3.LDH实验检测细胞LDH漏出率。4.WB检测NLRP3、Caspase1、Cleved-caspase1、GSDMD、GSDMD-N、IL-1β蛋白表达水平。5.ELISA检测细胞上清液中IL-1β的含量。结果:1.与Con组相比,0.45 m M H2O2处理RSC96细胞24 h,Caspase-1、Cleaved Caspase-1、GSDMD和GSDMD-N蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01),提示RSC96细胞焦亡发生。2.与Con组相比,H2O2组的细胞存活率显著降低(P<0.01);与H2O2组相比,25μM的姜黄素处理RSC96细胞15 min,H2O2+CUR组细胞存活率显著性升高(P<0.01)。3.与Con组相比,H2O2组细胞LDH漏出率明显升高(P<0.01);与H2O2组相比,H2O2+CUR组细胞LDH漏出率显著降低(P<0.05)。4.与Con组相比,H2O2组RSC96细胞NLRP3、Caspase-1、Cleaved Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N、IL-1β蛋白表达显著增加(P<0.05或P<0.01);与H2O2组相比,用姜黄素预处理后,H2O2+CUR组细胞的NLRP3、Caspase-1、Cleaved Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N、IL-1β蛋白表达显著下降(P<0.05或P<0.01)。5.与Con组相比,H2O2组细胞培养上清中IL-1β分泌明显增多(P<0.05);与H2O2组相比,H2O2+CUR组IL-1β分泌显著降低(P<0.05)。结论:姜黄素能减轻H2O2诱导的RSC96细胞损伤,其机制可能与其抑制细胞焦亡相关蛋白及促炎细胞因子的表达有关。
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