邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)致雄性大鼠生殖毒性及其机制的探讨

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目的:DEHP系雄性内分泌干扰物,对雄性生殖具有一定的影响,通过不同剂量DEHP暴露探索DEHP的雄性生殖毒性及其机制,同时探索维生素C、维生素E与DEHP的联暴露后对雄性生殖的影响。  方法:选择3-4周龄Wistar雄性大鼠随机分为6组,每组10只。①不同DEHP剂量暴露:O组为玉米油对照组,A、B、C组分别为低、中、高剂量DEHP暴露组(A:750mg/kg.d,B:1500mg/kg.d,C:3000mg/kg.d);②联合暴露:以C组DEHP高剂量暴露组作为对照,D、E组为联合暴露组(D:3000mg/kg.dDEHP+1%维生素C,E:3000mg/kg.d DEHP+1%维生素E)。DEHP灌胃暴露,维生素C和维生素E经自主饮水暴露,连续暴露6周后,处死大鼠并迅速剥离睾丸组织,计算睾丸脏器系数并测定其脂质过氧化损伤物质,利用HE染色观察睾丸组织形态学改变,运用ELISA法测定睾丸组织中生殖内分泌激素LH、T、FSH的水平以及8羟基脱氧鸟苷水平。  结果:1、脏器系数的影响:随着DEHP暴露剂量的增加,睾丸系数和附睾系数呈现一定的下降趋势,且中剂量组和高剂量组降低有统计学意义(P<0.05);维生素C干预后睾丸和附睾系数无明显变化,维生素E干预后附睾系数较高剂量DEHP暴露组有所升高(P<0.05)。2、睾丸组织形态学改变:低剂量DEHP暴露组与玉米油对照组相比无明显形态学变化,中剂量和高剂量DEHP暴露组生精小管萎缩、管腔内出现空泡样变化、生殖细胞数量减少、间质细胞大片聚集,且高剂量组损伤程度较中剂量组明显严重;维生素C与DEHP联合暴露后可见完整的生精小管,维生素E与DEHP联合暴露后较高剂量DEHP对照组生精小管形状规则、结构完整。3、脂质过氧化作用:DEHP高剂量暴露组8羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8OHdG)、脂质过氧化物(Lipid Peroxidation,LPO)、丙二醛(Maleic Dialdehyde,MDA)均有所升高,总超氧化物歧化酶(Total Superoxide Dismutase,T-SOD)有所降低,差异具有统计学意义(P<0.05);维生素C、维生素E干预后LPO、MDA较高剂量DEHP对照组有所降低,其中维生素E下降有统计学意义(P<0.05)。4、生殖激素的变化:DEHP高剂量暴露组睾酮(Testosterone,T)较玉米油对照组有所下降,卵泡刺激素(Follicle-stimulating Hormone,FSH)和促黄体生成素(Luteinizing Hormone,LH)较玉米油对照组有所升高(P<0.05),低剂量和中剂量DEHP暴露组较对照组无明显变化,此外,维生素C和维生素E干预后睾丸组织性激素水平变化无统计学差异。  结论:DEHP能够引起青春期Wistar雄性大鼠睾丸组织脂质过氧化损伤,导致睾丸组织萎缩和生殖内分泌紊乱;维生素C和维生素E对DEHP所致损伤有一定拮抗作用。
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