本研究旨在利用复合PCR技术,以真菌感染动物模型为工具,建立快速、敏感、特异的系统性真菌感染的鉴定、诊断方法。首先,通过比对GenBank公布的翻译延伸因子(TEF1α)基因序列,自主设计了3对应用于复合PCR的属特异性引物,分别对19属54株真菌的DNA进行扩增,检测了引物属特异性和属内通用性;利用复合PCR技术,在一个反应体系同时对念珠菌、曲霉及接合菌(毛霉和根霉)进行鉴定。其次,分别建立了三种病原菌的系统性感染(白色念珠菌、烟曲霉、卷枝毛霉)实验动物模型,取小鼠的血液、组织标本分别进行组织学鉴定和PCR扩增,并比较了两种方法的检测的阳性率。研究表明,自主设计的三对引物具有较好的属特异性和属内通用性,应用复合PCR技术,可在一个反应体系中同时对四属真菌进行鉴定;通过PCR扩增可直接从感染动物的血液、组织标本中检出病原菌,且对于血液标本来说,PCR扩增方法的阳性率明显优于真菌学培养法。本研究建立了利用复合PCR技术一次鉴定多属病原真菌的方法,并能使用PCR扩增直接检测真菌感染小鼠血液、组织标本中的病原菌。研究建立的方法具有快速、敏感、特异,易于操作等优点,适于临床实验室推广。