研究背景肺癌是世界上导致肿瘤患者死亡最常见的恶性肿瘤,主要在进展期才能被诊断,此刻大约30-40%的非小细胞肺癌已经存在转移性疾病,治疗措施有限[1]。治疗已有转移的非小细胞肺癌的传统方法是化疗。在90年代,出现了第三代细胞毒药物,如紫杉醇、多西紫杉醇、长春瑞滨、盐酸氨柔比星、吉西他滨等。吉西他滨是其中最有效的一种治疗吉西细胞肺癌的药物[2]。与铂类连用作为一线药物治疗非小细胞肺癌时,生存率超过铂类和任何一类药物的联合应用,卡铂和吉西他滨联用是目前最有效方便的治疗措施[3]。人参多糖(GPS)为传统中药人参的主要成分之一,能够通过促进淋巴细胞和巨噬细胞产生免疫球蛋白增加免疫力,提高抗补体效应和网状内皮细胞系统反应,诱导IL-2, IFN-r, IL-1,粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子RNA的表达[4],此外,可以刺激细胞介导的免疫反应和自然杀伤细胞的细胞毒性,从而对广泛的肿瘤细胞株有细胞毒作用,不存在组织相容性的限制[5]。这两种药物可能通过诱导细胞凋亡达到杀死肺癌细胞的效应,但具体机制不清。TRAIL是一种很有前途的可以作为治疗肿瘤的基因,可以特异性杀伤分化细胞和肿瘤细胞,而对正常细胞没有影响。通过与细胞表面TRAIL的死亡受体DR-4,DR-5结合诱导细胞产生凋亡[6]。Bcl-2作为目前已知的最强的抗凋亡基因,其表达产物Bcl-2蛋白具有阻断程序化细胞死亡的作用,从而导致肿瘤的发生与发展。本课题拟对吉西他滨、人参多糖对人非小细胞肺癌A549细胞的凋亡作用及其与凋亡相关基因TRAIL,Bcl-2的表达进行研究。目的:研究吉西他滨、人参多糖体外对人非小细胞肺癌A549细胞增殖及凋亡的作用,以及与TRAIL,Bcl-2表达的关系。方法:应用MTT法、流式细胞仪、Annexin-V——PI双标法、TUNEL法等多项方法,体外研究吉西他滨,人参多糖对A549细胞的增殖和凋亡的作用;采用Western-blot的方法,观察药物作用后Bcl-2、TRAIL的变化。结果:吉西他滨人参多糖均对A549细胞生长具有抑制作用,并有促凋亡效应。吉西他滨对细胞周期的影响表现为S期的阻滞,药物处理的细胞凋亡,可见伴有Bcl-2的下调,TRAIL表达无明显变化。人参多糖对对细胞周期的影响表现为Go/G1期的阻滞,未见Bcl-2表达的下调,可见TRAIL表达升高。结论:吉西他滨、人参多糖可抑制人非小细胞肺癌A549细胞的生长,并诱导细胞发生凋亡,其诱导凋亡是其抗肿瘤作用机制的原因之一,而且凋亡与Bcl-2,TRAIL的表达具有一定关系。