PPP2R1A基因突变在上皮性卵巢癌发病过程中的作用机制研究

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:weaselhyp
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目的:通过研究PPP2R1A基因突变能否真正促进上皮性卵巢癌的发病,并进一步探讨突变的促癌作用是否可能通过影响其参与编码的PP2A磷酸酶复合物的活性所介导的。方法:前期我们成功构建了PPP2R1A基因的野生型和突变型转基因细胞:ES-2-e GFP细胞(空载体)、ES-2-WT(PPP2R1A基因野生型)、ES-2-MT1细胞(PPP2R1A p.R183W氨基酸突变)和ES-2-MT2细胞(PPP2R1A p.W257C氨基酸突变)。我们通过提取细胞总蛋白,免疫沉淀法沉淀PP2A蛋白复合物,利用丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶活性检测试剂盒检测上述不同细胞的PP2A磷酸酶活性;CCK-8法检测细胞的增殖能力、Transwell小室法检测细胞的迁移和侵袭能力、平板克隆形成实验检测细胞的成瘤能力,以及流式细胞仪检测细胞的凋亡水平。结果:1.PPP2R1A基因突变能降低细胞的增殖能力,抑制细胞凋亡,同时增强细胞迁移、侵袭能力及细胞成瘤能力;2.PPP2R1A基因突变抑制PP2A磷酸酶的活性。结论:PPP2R1A基因突变可促进ES-2细胞的恶性转化,且突变所致的PP2A蛋白磷酸酶活性下降可能在其中扮演着重要作用。这些发现表明PPP2R1A基因突变在上皮性卵巢癌的发生发展中可能起着重要作用。
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