【摘 要】
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目的:探讨Apoptin对胃癌细胞SGC7901的作用及机理。方法:利用非增殖腺病毒AdHu5作为载体携带Apoptin全长基因,采用细胞增殖实验、克隆形成实验、细胞周期和细胞凋亡检测以及动物
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目的:探讨Apoptin对胃癌细胞SGC7901的作用及机理。方法:利用非增殖腺病毒AdHu5作为载体携带Apoptin全长基因,采用细胞增殖实验、克隆形成实验、细胞周期和细胞凋亡检测以及动物实验研究AdHu5-Apoptin在体内外对胃癌细胞株SGC7901的抑制作用,采用生物信息技术结合westernblot和免疫组化方法初步探索了Apoptin处理的胃癌细胞和胃癌组织中CARD18的表达情况。结果:本实验已经成功构建了能表达全长Apoptin的重组腺病毒载体,测定了AdHu5-Apoptin在体内外对胃癌细胞株SGC7901具有明显的抑制作用。相对于对照组,转染AdHu5-Apoptin的胃癌细胞组的克隆形成减少75%,且凋亡周期阻滞于G2/M期,凋亡相关蛋白(caspases-3,-7and-9)在凋亡素处理组的表达明显高于对照组,体内成瘤实验也同样证实AdHu5-Apoptin能明显抑制胃癌细胞的生长。凋亡素处理后的胃癌细胞CARD18表达下调最明显,在胃癌组织中CARD18蛋白的表达明显高于癌旁组织(P<0.05),且随着胃癌分期的增加,CARD18的表达量随之增加(P<0.05)。结论:已经成功构建了能表达全长Apoptin的重组腺病毒载体,测定了AdHu5-Apoptin在体内外对胃癌细胞株SGC7901具有明显的抑制作用,并初步研究发现CARD18可作为胃癌治疗的靶向标志物和预后的指标。3
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