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目的用神经行为学实验结合免疫组化技术,研究MK801和吗啡在大鼠外周神经损伤性神经源性疼痛模型上对神经行为学改变的影响以及对背根神经节内生长相关蛋白43(growth associated protein,GAP-43)和神经生长因子(nerve growth factor,NGF)表达的影响。方法和材料成年SD大鼠85只,雌雄不限,随机分成5大组,I组:正常对照组(5只大鼠),II组:坐骨神经慢性压迫性损伤(chronic constriction injury, CCI)组,III组:坐骨神经慢性压迫性损伤后生理盐水治疗对照组(CCI+NS group),IV组:坐骨神经慢性压迫性损伤后MK801治疗组(CCI+MK801 group),V组:坐骨神经慢性压迫性损伤后吗啡治疗组(CCI+Morphine group),II、III、IV和V组再按术后取材时间分为1、3、7、14天4个亚组(每亚组5只)。手术只损伤右侧坐骨神经,左侧作为正常对照。其中MK801的给药剂量为0.1mg/kg q12h腹腔注射,吗啡的给药剂量为5 mg/kg q12h腹腔注射。II、III、IV和V组大鼠分别于术后1、3、7、14天测量大鼠的机械缩足反射阈值(MWT)和热缩腿潜伏期(TWL),测量完毕后取与伤侧坐骨神经相连的背根神经节,应用免疫组织化学和图像分析的方法研究背根神经节中GAP-43和NGF的表达并进行半定量分析。结果MWT和TWL:①与正常组比较,CCI组、CCI+NS组、CCI+MK801组和CCI+Morphine组的大鼠术后1天的MWT和TWL的差别无统计学意义(P>0.05);②与正常组比较,CCI组、CCI+NS组、CCI+MK801组和CCI+Morphine组的大鼠术后3、7、14天均出现MWT和TWL的明显缩短(P<0.01);③CCI组与CCI+NS组比较,相同时间点其MWT和TWL差别无统计学意义(P>0.05);④CCI+MK801组与CCI+NS组比较,术后3、7、14天同时间点的MWT和TWL均明显延长(P<0.01);⑤CCI+Morphine组与CCI+NS组比较,术后3、7、14天同时间点的MWT和TWL均明显延长(P<0.01)背根神经节内GAP-43和NGF的表达:①与正常组比较,CCI组、CCI+NS组、CCI+MK801组和CCI+Morphine组的大鼠术后均出现了GAP-43和NGF的表达明显增强(P<0.01);②CCI组与CCI+NS组比较,GAP-43和NGF的表达差别无统计学意义(P>0.05);③CCI+MK801组与CCI+NS组比较,术后同时间点背根神经节内GAP-43和NGF的表达均明显减少(P<0.01);④CCI+Morphine组与CCI+NS组比较,术后同时间点背根神经节内GAP-43和NGF的表达均明显减少(P<0.01);⑤CCI组GAP-43的表达在观察期内呈现逐渐增高的趋势,在14天时达到高峰;而CCI组NGF的表达在术后3天时先显著增高,然后逐渐下降,但仍维持在较高表达状态,与术前比较P<0.01。结论1. GAP-43和NGF与神经源性疼痛的发生关系密切。坐骨神经慢性压迫性损伤的神经源性疼痛的模型中,背根神经节内GAP-43和NGF的表达比正常组明显增加,提示GAP-43和NGF可能参与了神经源性疼痛的分子机制形成。2.腹腔注射MK801 0.1mg/kg q12h对神经病理性疼痛大鼠能产生明显的镇痛效应,同时明显抑制背根神经节GAP43和NGF表达的增加,表明对GAP43和NGF表达的抑制是MK801外周镇痛的机制之一。然而并未能使GAP-43和NGF降至正常,结合行为学实验说明该剂量的MK801未能达到完全抑制神经源性疼痛的治疗效果。3.腹腔注射吗啡5mg/kg q12h对神经病理性疼痛大鼠能产生明显的镇痛效应,同时明显抑制背根神经节GAP43和NGF表达的增加,表明对GAP43和NGF表达的抑制是吗啡外周镇痛的机制之一。然而并未能使GAP-43和NGF降至正常,结合行为学实验说明该剂量的吗啡未能达到完全抑制神经源性疼痛的治疗效果。