论文部分内容阅读
阿霉素(Adriamycin,ADR)是临床上广泛使用的蒽环类抗癌药物,它通过嵌入DNA碱基对中影响DNA的复制从而对于治疗各种肿瘤疾病具有明显疗效。但由于治疗过程中所带来的副作用使其使用受到一定限制。利用肿瘤细胞表面过度表达的转铁蛋白受体与转铁蛋白(Transferrin,Tf)的特异性结合,将阿霉素与转铁蛋白结合制备的导向药物可提高药物的靶向性和降低毒副作用。为了揭示ADR-Tf复合物与DNA相互作用的特性,探讨其在作为导向药物方面的作用机制,本文利用光谱及电分析化学方法,对ADR及ADR-Tf复合物与DNA的相互作用进行探讨及比较。 采用荧光光谱方法,研究了ADR与Tf之间的相互作用,ADR对Tf在330nm处的荧光峰具有猝灭作用。利用荧光光谱法和紫外吸收光谱法进一步研究了ADR与Tf之间的结合作用,确定了ADR对Tf荧光猝灭过程的猝灭机理为静态猝灭,测定了不同浓度下ADR与Tf的结合常数K=0.45~10.3×107,结合位点数n=1.09~1.37,并依据能量转移理论确定了当Tf及ADR浓度分别为5.6×10-6mol·L-1和6.9×10-5mol·L-1情况下两者的结合距离r=1.94nm。 以紫外吸收光谱、差示紫外吸收光谱及荧光光谱法研究了ADR、ADR-Tf复合物与DNA作用的差异:ADR-Tf复合物仍具有ADR插入结合的特征,与DNA形成了DNA-Tf-ADR的三元结合物。以EB作为荧光探针,运用荧光猝灭法研究了ADR及ADR-Tf复合物与DNA之间的相互作用关系,利用Scatchard方程,对ADR及ADR-Tf复合物与EB-DNA之间相互作用的结合常数K及结合位点数n进行计算,结果分别为KADR-DNA=1.10×106、KADR-Tf-DNA=1.95×106,结合位点数分别为nADR-DNA=4.31、nADR-Tf-DNA=2.65;同时与EB-DNA的结合常数及结合位点数进行比较,得出ADR以嵌插方式与DNA相结合而ADR-Tf复合物以嵌插方式及静电作用与DNA相结合的结论。此外,以ADR作为荧光探针,从另外一个角度研究了ADR及ADR-Tf复合物与DNA之间的相互作用,求得ADR、ADR-Tf复合物与DNA的结合常数分别为KADR-DNA=1.43×106、KADR-Tf-DNA=1.44×106,结合位点数分别为nADR-DNA=4.53、nADR-Tf-DNA=3.40;同样通过与EB-DNA的结合常数及结合位点数进行比较,得出与以EB为荧光探针