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本论文以杜仲(Eucommia ulmodie oliver)中降血压活性成分京尼平苷酸(Geniposidic acid, GPA,下同)和松脂醇二葡萄糖苷(Pinoresinool Diglucoside, PDG,下同)为研究对象,研究了其提取、分离及纯化方法及工艺,并对杜仲中多种活性成分的同时检测方法进行了研究。具体研究结果如下：1.确定了提取、分离及纯化杜仲叶提取物中GPA的优化方法及工艺。(1)获得了杜仲叶提取物中GPA的优化提取方法及工艺。采用超声辅助溶剂提取法。以60%乙醇-水溶液(V/V)为提取溶剂,提取温度60℃、提取2次、提取时间60min/次。在上述优化工艺下,GPA提取率达93.42%。(2)获得了杜仲叶提取物中GPA的优化分离、纯化方法及工艺。采用大孔吸附树脂柱层析方法。通过常温下的静态吸附、脱附实验,优选出S-8型大孔吸附树脂作为分离、纯化GPA的首选树脂。通过动态吸附、脱附实验,优化出洗脱S-8型大孔吸附树脂中GPA的工艺为：用水作为洗脱剂,脱附剂用量300mL、脱附剂流速3mL/min、上柱液pH1.0,脱附剂流速对脱附过程的影响最大、上柱液pH值影响最小。在上述优化工艺下,GPA的平均脱附率达89.64%。2.确定了联合提取、分离及纯化杜仲生皮中GPA和PDG的优化方法及工艺。(1)获得了联合提取杜仲生皮中GPA和PDG的优化方法及工艺。采用加酶微波辅助溶剂提取法。用水作为提取溶剂,按照1：15(g/mL)、1：1(g/mL)加入蒸馏水、0.5%纤维素酶溶液,提取温度60℃,微波辐射2次、每次30min。在上述优化工艺下,GPA和PDG的提取率分别达90.98%和92.43%。(2)获得了联合分离、纯化杜仲生皮提取物中GPA和PDG的“聚酰胺柱层析预处理-S-8型大孔吸附树脂吸附—水洗脱GPA—40-50%(V/V)乙醇-水溶液洗脱PDG”的优化组合方法及工艺。采用大孔吸附树脂柱层析方法。通过常温下的静态吸附、脱附实验,优选出S-8型大孔吸附树脂作为联合分离、纯化GPA和PDG的首选树脂。通过动态吸附、脱附实验,优化出洗脱S-8型大孔吸附树脂中GPA、PDG的工艺为：先用水洗脱GPA,水用量300mL,流速3mL/min;再用40-50%的乙醇-水溶液(V/V)洗脱PDG,洗脱剂用量250mL,流速5mL/min。在上述优化工艺下,GPA和PDG的平均洗脱率分别达88.56%%和89.34%。洗脱液经浓缩、冷冻干燥后,所得粉状纯化产物中GPA、PDG的纯度分别达78.24%和76.83%。相对于杜仲生皮提取液中GPA (1.642%)、PDG (0.2985%)的含量,分离、纯化效果显著。3.建立了两个能同时测定杜仲提取物中四种活性成分含量的高效液相色谱(HPLC)方法。(1)建立了同时测定杜仲中京尼平苷酸(GPA)、绿原酸(CA)、京尼平苷(GP)和芦丁(Rutin)含量的定波长—梯度洗脱模式HPLC检测方法。优化检测条件为：Shimadzu高效液相色谱仪,SPD-20A型UV检测器,ODS-C18反相色谱柱(250mm4.6mm,5μm),柱温37℃,波长254nm,进样5μL,流动相：A相为甲醇、B相为0.1%磷酸-水溶液(2：98),流速0.8mL/min,梯度洗脱程序：0.01min-30.00min:70→30(B相在整个流动相中的百分比,下同),30.00min-30.01min:30→70,30.01min1~40.00min:70。在上述色谱条件下,四种成分分离良好,GPA、CA、GP和Rutin进样量的线性关系范围分别为0.3～2.4μ g、0.26～1.28μg、0.05～1.375μg和0.12～1.5μg,精密度RSD分别为1.838%、1.907%、1.094%和1.349%,平均回收率分别在98.31%-101%、98.78%101%、99.23%-100.9%和97.60%102%之间。该检测方法的精密度良好、准确性较高,满足分析要求。(2)建立了同时测定杜仲中京尼平苷酸(GPA)、绿原酸(CA)、松脂醇二葡萄糖苷(PDG)和芦丁(Rutin)含量的变波长-梯度洗脱模式HPLC检测方法。优化检测条件为：Shimadzu高效液相色谱仪,SPD-20A型UV检测器,ODS-C18反相色谱柱(250mmX4.6mm,5μm);柱温37℃；进样量5μL；流动相：A相为甲醇、B相为0.1%磷酸-水溶液,流速0.8mL/min,梯度洗脱程序：0.01min~30.00min:7O→k30(B相在整个流动相中的百分比,下同),30.00min-30.01min:30→70,30.01min1~40.00min:70;检测波长程序：0.01min-7.00min:254nm,7.01min~12.50min:277nm,12.51min~40. OOmin:254nm。在上述色谱条件下,四种成分分离良好,GPA、CA、GDP和Rutin进样量的线性关系范围分别为0.3-2.4μg、0.26～1.28μg、0.05～1.375μg和0.12-1.5μg,精密度RSD分别是2.074%、0.973%、2.019%和1.981%,平均回收率分别为101.93%、97.44%、96.93%和104.56%。该检测方法的因其良好的精密度和较高准确性能够满足分析要求。