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目的:研究苗药黑骨藤抗类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis，RA)有效部位及化学成分，明确黑骨藤药材抗RA的药效物质基础，为建立以抗RA药效物质为基础的黑骨藤药材质量评价方法提供理论依据。
方法:1.以RA动物模型CIA大鼠模型为研究对象，大鼠左右后足足趾厚度，关节炎指数，踝关节滑膜组织病理变化和促炎细胞因子(IL-6，IL-1β和TNF-α)为评价指标，体内筛选黑骨藤药材抗RA有效部位;2.利用小鼠单核巨噬细胞RAW264.7，以NO和TNF-α为量性指标，以及DPPH自由基清除实验，体外筛选黑骨藤药材抗炎和抗氧化有效部位;3.对有效部位的化学成分采用硅胶和Sephadex LH-20凝胶柱色谱分离纯化，根据13C-NMR谱和1H--NMR谱数据鉴定化合物结构。
结果:1.黑骨藤药材石油醚部位，乙酸乙酯部位和正丁醇部位均具有良好的体内抗RA活性，可减少CIA大鼠足趾肿胀和关节炎评分，改善滑膜组织病理学变化。同时，减少了CIA大鼠血清中的促炎细胞因子IL-6，IL-1β和TNF-α过度表达。其中，乙酸乙酯部位体内抗RA作用相对更好;2.黑骨藤药材石油醚部位和氯仿部位均具有良好的体外抗炎活性，且石油醚部位抗炎活性更强，但石油醚部位相对氯仿部位细胞毒性较大。黑骨藤药材乙酸乙酯部位，正丁醇部位和水部位均具有良好的体外抗氧化活性，其中，乙酸乙酯部位体外抗氧化能力最强;3.在黑骨藤药材氯仿部位和乙酸乙酯部位共分离鉴定出10个单体化合物，其中2个三萜类化合物，分别为熊果酸和α-香树脂醇乙酯，2个甾体类化合物，分别为丁酰鲸鱼醇和β-谷甾醇，2个烷烃类化合物，分别为十六烷酸和二十六烷，1个强心苷类化合物为杠柳苷元，1个简单苯丙素类化合物为阿魏醛，另外还有香草醛和丁香醛。
结论:通过系统的药理学实验评价黑骨藤药材抗RA作用的有效部位，明确黑骨藤药材石油醚部位，乙酸乙酯部位和正丁醇部位均具有良好的体内抗RA活性。通过体外抗炎和抗氧化实验，明确黑骨藤药材石油醚部位和氯仿部位均具有良好的体外抗炎活性，乙酸乙酯部位，正丁醇部位和水部位均具有良好的体外抗氧化活性。通过查阅文献，实验中分离得到的熊果酸可以作为黑骨藤药材中抗RA的药效物质基础之，可以作为黑骨藤药材质量评价指标之一。
方法:1.以RA动物模型CIA大鼠模型为研究对象，大鼠左右后足足趾厚度，关节炎指数，踝关节滑膜组织病理变化和促炎细胞因子(IL-6，IL-1β和TNF-α)为评价指标，体内筛选黑骨藤药材抗RA有效部位;2.利用小鼠单核巨噬细胞RAW264.7，以NO和TNF-α为量性指标，以及DPPH自由基清除实验，体外筛选黑骨藤药材抗炎和抗氧化有效部位;3.对有效部位的化学成分采用硅胶和Sephadex LH-20凝胶柱色谱分离纯化，根据13C-NMR谱和1H--NMR谱数据鉴定化合物结构。
结果:1.黑骨藤药材石油醚部位，乙酸乙酯部位和正丁醇部位均具有良好的体内抗RA活性，可减少CIA大鼠足趾肿胀和关节炎评分，改善滑膜组织病理学变化。同时，减少了CIA大鼠血清中的促炎细胞因子IL-6，IL-1β和TNF-α过度表达。其中，乙酸乙酯部位体内抗RA作用相对更好;2.黑骨藤药材石油醚部位和氯仿部位均具有良好的体外抗炎活性，且石油醚部位抗炎活性更强，但石油醚部位相对氯仿部位细胞毒性较大。黑骨藤药材乙酸乙酯部位，正丁醇部位和水部位均具有良好的体外抗氧化活性，其中，乙酸乙酯部位体外抗氧化能力最强;3.在黑骨藤药材氯仿部位和乙酸乙酯部位共分离鉴定出10个单体化合物，其中2个三萜类化合物，分别为熊果酸和α-香树脂醇乙酯，2个甾体类化合物，分别为丁酰鲸鱼醇和β-谷甾醇，2个烷烃类化合物，分别为十六烷酸和二十六烷，1个强心苷类化合物为杠柳苷元，1个简单苯丙素类化合物为阿魏醛，另外还有香草醛和丁香醛。
结论:通过系统的药理学实验评价黑骨藤药材抗RA作用的有效部位，明确黑骨藤药材石油醚部位，乙酸乙酯部位和正丁醇部位均具有良好的体内抗RA活性。通过体外抗炎和抗氧化实验，明确黑骨藤药材石油醚部位和氯仿部位均具有良好的体外抗炎活性，乙酸乙酯部位，正丁醇部位和水部位均具有良好的体外抗氧化活性。通过查阅文献，实验中分离得到的熊果酸可以作为黑骨藤药材中抗RA的药效物质基础之，可以作为黑骨藤药材质量评价指标之一。