目的:探究在三氧化二砷（Arsenic trioxide,As₂O₃）联合叠氮胸苷（3’-azido-3’-deoxythymidine,AZT）促肝癌细胞凋亡过程中Egr-1的作用及水通道蛋白9（Aquaporin9,AQP9）的表达,并对其可能的作用机制进行初步探究,为两药的联合用药方案提供更充分的理论依据。方法:传代培养人肝癌HepG2细胞,采用电转染法瞬时转染Egr-1 siRNA,细胞转染24h后用药干预。实验分为Mock组（空白对照组）、NC组（非特异性对照组,转染非特异序列）和Egr-1 siRNA组（转染Egr-1 siRNA）。各组细胞经As2 O3联合AZT（终浓度为2和20μmol/L）干预后,实时荧光定量PCR（q-PCR）法分别检测Egr-1siRNA转染效率以及Egr-1、Caspase3、p53基因的表达水平;蛋白质印迹法（Western blot）检测Egr-1、Caspase3、p53的蛋白表达水平。传代培养人肝癌HepG2和MHCC97 H细胞系,以未经药物处理的HepG2和MHCC97 H细胞为空白对照,用MTT法检测As2 O3（2μmol/L）联合不同浓度AZT（0、10、20μmol/L）作用48h后,两株细胞的增殖抑制率（Inhibition rate,IR）;q-PCR法与Western blot法检测用药后两株细胞中AQP9的mRNA及其蛋白表达水平。结果:电转染Egr-1 siRNA转染效率可达75%以上;q-PCR结果表明目的Egr-1 siRNA组细胞与Mock组和NC组相比,2μmol/L As₂O₃联合20μmol/L AZT干预后Egr-1、Caspase3、p53的表达量明显下调（P<0.05）,而药物作用后非NC组和Mock组相比,各基因的表达差异无统计学意义（P>0.05）;WB实验检测各基因蛋白水平的变化得到一致的结果。2μmol/L As₂O₃联合20μmol/L AZT干预后,HepG2和MHCC97H细胞的增殖抑制率高于空白对照组（P<0.05）。联合用药组（2μmol/L As₂O₃+20μmol/LAZT）AQP9的mRNA和蛋白的表达量明显高于As₂O₃组和空白对照组（P<0.05）。结论:（1）Egr-1可能是通过上调p53及Caspase3的表达在As₂O₃联合AZT促肝癌细胞HepG2细胞凋亡中发挥作用的。（2）AZT可能通过增加AQP9的表达促进HepG2及MHCC97H细胞对As₂O₃的摄入,促进其对肝癌细胞的增殖抑制作用。