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目的最近我们发现从太白银莲花（分布在中国秦岭山脉）根茎中提取的多种新型三萜皂苷类化合物中，太白银莲花皂苷-A对恶性胶质瘤细胞具有极强的生长抑制活性。本研究试图通过探讨太白银莲花皂苷-A对胶质瘤细胞系U87及对照细胞VEC304（内皮细胞系）体外实验研究，揭示这一新型皂苷如何导致胶质瘤细胞增殖抑制和凋亡以及其分子机制，为新型药物研发提供实验依据。方法1．以四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法，检测不同浓度（0、0.5、1、2、4、8、16ug/ml）太白银莲花皂苷-A对U87细胞和VEC304细胞存活率的影响。2．流式细胞仪分析不同浓度（1.13μg/ml,1.75μg/ml,2.73μg/ml）太白银莲花皂苷-A处理U87细胞0,8,16,24小时后，各药物浓度组细胞周期分布情况。3．利用Hoechst33342核染色法，对不同浓度太白银莲花皂苷-A处理6,12,18,24小时后U87细胞进行核染色，荧光显微镜下观察细胞及细胞核形态学变化。4．透射电子显微镜观察太白银莲花皂苷-A处理后U87细胞超微结构变化。5．AnnexinV/IP双染，流式细胞仪检测太白银莲花皂苷-A处理后U87细胞凋亡比率。6．免疫印迹（Western blot）法，检测凋亡相关分子Fas、Fas-L、Pro-caspase8、Pro-caspase3、Bcl-2、Bax等分子的表达，探讨太白银莲花皂苷-A致U87细胞凋亡的机制。结果1.极低浓度太白银莲花皂苷-A溶液(1,2,4，8μg/ml)处理后，U87细胞生存率明显下降，并呈浓度依赖性，而正常人血管内皮细胞VEC304生存率未受到显著影响。2.流式细胞仪检测数据分析显示太白银莲花皂苷-A处理后分布于S期的U87细胞数量明显增多，G1期细胞分布比率相应下降。3. Hoechst33342核染色试验中，U87细胞经不同浓度（0，1.13μg/ml,1.75μg/ml,2.73μg/ml）太白银莲花皂苷-A处理后6小时，即可见典型细胞凋亡形态学变化，包括：核碎裂，染色质浓集，细胞萎缩，包膜完整性破坏或变形等。并且这一现象随浓度增加及处理时间延长更加明显。4.电子显微镜观察到U87细胞经太白银莲花皂苷-A处理12小时后出现典型且普遍的染色质边集现象；处理24小时后，凋亡小体出现明显增多。5.流式细胞仪分析显示，U87细胞经太白银莲花皂苷-A（1.75ug/ml）分别处理6,12,24小时后，早期凋亡细胞比率逐渐增多，呈明显时间依赖性。6.免疫印迹试验检测发现，太白银莲花皂苷-A（1.75ug/ml IC50）处理U87细胞6,12,24小时后，Fas以及FasL蛋白表达均逐渐上调，而caspase-8前体以及caspase-3前体均呈明显的逐渐下降趋势，具有时间依赖性。Caspase-8，-3活化片段均可被检测，并且前者出现的表达峰值较早（处理后6小时）。Bcl-2表达没有明显的变化。Bax蛋白的表达在本实验中未检测出。结论1.太白银莲花皂苷-A可以在极低浓度下可抑制胶质瘤U87细胞增殖，而相应低浓度下对正常血管内皮VEC304细胞没有表现出影响，因此具有特异的抑制胶质瘤增殖的生物活性。2.太白银莲花可以导致U87细胞S期阻滞，说明太白银莲花皂苷-A导致的胶质瘤增殖抑制与其周期阻滞活性有关。目前细胞S期阻滞机制尚不明确，因此该种化合物极具科研研究价值。3.通过实验我们证实了，太白银莲花皂苷-A可以在体外诱导U87细胞凋亡，其诱导凋亡发生的效果具有浓度及时间依赖性。4.在对太白银莲花皂苷-A诱导凋亡机制的研究中，我们发现多种凋亡相关蛋白的表达与Fas凋亡通路机制吻合，考虑该种药物诱导细胞凋亡的机制与Fas/FasL相关的死亡受体凋亡通路有关。5.综合上述研究，太白银莲花皂苷-A具有极强的致肿瘤细胞凋亡及增殖抑制活性，因而具有很好的药物研究价值。