脑胶质瘤(glioma)是人类最常见的颅内原发性肿瘤,其中胶质母细胞瘤的生存期一般不超过12个月,5年存活率仅有5%,对人类生命健康造成严重威胁。脑胶质瘤病因比较复杂,传统上认为主要与遗传、基因突变及物理化学因素等有关,近年来病毒感染与之相关的观点及证据逐渐成为研究热点。多项研究发现在神经胶质瘤患者肿瘤组织中检测到人类疱疹病毒6型(human herpesvirus 6,HHV-6)核酸及蛋白的存在,本实验室前期从胶质瘤囊液标本中成功分离出HHV-6,40例胶质瘤组织标本检测发现HHV-6核酸阳性率为42.5%,与正常脑组织相比具有显著性差异。表明HHV-6感染在胶质瘤的病因和发展中起了一定的作用。文献报道及生物信息学比较发现HHV-6 DR7基因是潜在的转化基因并且具有反式激活作用,是HHV-6致瘤的关键基因。本研究拟探讨HHV-6 DR7基因的表达对人胶质瘤细胞U87生物学性状的影响。本论文共分为两个部分:第一部分:PCR扩增HHV-6DR7-6×His Tag基因,克隆至慢病毒表达载体pLenti6.3_MCS-IRES2-EEGFP。利用293T细胞进行慢病毒的包装和大量复制,从而获得高滴度的重组慢病毒。DR7基因重组慢病毒感染U87细胞,经流式细胞仪筛选和blasticidin药物筛选,获得稳定表达目的基因的稳定株,为后续研究HHV-6 DR7基因对U87细胞生物学性状的影响奠定基础。第二部分:以稳定表达HHV-6 DR7基因的U87细胞株为研究对象,采用CCK-8、软琼脂克隆、细胞划痕、Transwell侵袭实验和鸡胚绒毛尿囊膜实验观察DR7基因表达对U87细胞增殖、迁移、侵袭及血管形成能力的影响。结果发现HHV-6 DR7基因的稳定表达能够促进U87细胞的增殖、迁移、侵袭及血管形成。细胞周期检测表明DR7基因能够促进细胞周期的运行,S期和G2/M期比例明显增高。综上所述,本实验成功构建了稳定表达HHV-6 DR7基因的U87-DR7-EGFP细胞株,DR7基因的稳定表达能够促进U87细胞的增殖、迁移、侵袭和血管形成。本研究结果将为治疗神经胶质瘤提供新的思路及靶标。