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目的:通过腹主动脉缩窄法建立射血分数保留心衰(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)大鼠模型,探讨顺心组方干预HFpEF大鼠作用及机制。方法:1.建立HFpEF大鼠模型:48只雄性SD大鼠随机分为正常组8只、假手术组8只、造模组32只。通过缩窄大鼠腹主动脉方法,建立HFpEF大鼠模型。术后三个月,超声检测大鼠心功能,评价模型是否成功。2.顺心组方干预HFpEF大鼠作用的观察:将32只HFpEF大鼠随机分为模型组8只、顺心组方大剂量组8只、顺心组方小剂量组8只和芪苈强心胶囊组8只,每天以顺心组方3 ml/100g、1 ml/100g和芪苈强心胶囊1 ml/100g分别给予顺心组方大剂量组、顺心组方小剂量组和芪苈强心胶囊组大鼠灌胃,连续给药14天。检测各组大鼠心功能;腹主动脉采血分离血清,处死大鼠,分离心脏、肾脏和脑并称重,计算心脏指数;每只大鼠切取部分心室组织,做石蜡切片,进行HE染色和Masson染色,观察心肌细胞形态和胶原纤维变化;电镜观察心肌细胞超微结构;ELISA法测定血清NT-proBNP。3.靶点预测:利用网络药理学预测顺心组方各组成中药作用于cGMP-PKG信号通路的靶点,结合相关文献资料确定所要检测靶点。4.顺心组方干预HFpEF大鼠机制研究:将预测靶点NPRA和GC用免疫组化法检测,eNOS、PDE5A和PKG I用免疫印迹法检测。结果:1.造模术后三个月各组大鼠心功能:与正常组比较,造模组大鼠IVSd、PWd、E/A增高(P<0.05);各组大鼠LVEF无统计学差异;表明成功建立HFpEF大鼠模型。2.药物干预后:与正常组比较,模型组IVSd、PWd、E/A值均增高(P<0.01);与模型组比较,顺心组方大剂量组、顺心组方小剂量组和芪苈强心胶囊组的IVSd、PWd均降低(P<0.01),顺心组方大剂量组E/A值降低(P<0.01)。与正常组比较,模型组心脏指数增大(P<0.05)。HE染色示,与模型组比较,顺心组方大剂量组、顺心组方小剂量组和芪苈强心胶囊组心肌细胞排列较整齐。Masson染色可见,与正常组相比,模型组CVF增大(P<0.05)。电镜观察心肌细胞超微结构,模型组可见部分肌原纤维断裂,部分肌节溶解,肌原纤维内部分肌丝排列疏松,心肌闰盘解离,部分线粒体肿大破裂,而顺心组方大剂量组、顺心组方小剂量组、芪苈强心胶囊组的肌原纤维和线粒体损伤较模型组轻。血清NT-proBNP检测结果,与正常组相比,模型组NT-proBNP增高(P<0.05)。3.网络药理学预测,确定的靶点有NPRA、GC、eNOS、PDE5A、PKG I。4.免疫组化检测心肌NPRA、GC的结果:与正常组比较,模型组心肌NPRA、GC表达减少(P<0.01);与模型组比较,顺心组方小剂量组和芪苈强心胶囊组心肌NPRA、GC表达增多(P<0.01)。WB检测eNOS、PKG I、PDE5A的结果:与正常组比较,模型组eNOS、PKG I表达降低(P<0.01),PDE5A表达增高(P<0.01);与模型组比较,顺心组方大剂量组eNOS表达增多(P<0.01),PKG I表达增多(P<0.05),顺心组方大剂量组、顺心组方小剂量组和芪苈强心胶囊组心肌PDE5A表达均减少(P<0.01)。结论:顺心组方可以有效改善HFpEF大鼠的心脏舒张功能;其机制是通过上调心肌细胞cGMP-PKG信号通路的NPRA、GC、eNOS表达,使cGMP表达增多,下调PDE5A表达,减少cGMP降解,使cGMP持续作用于PKG I靶点,逆转心肌肥厚,有效改善HFpEF大鼠的心肌顺应性。